非特異性結合對CYP3A4酶促反應動力學的影響.pdf

1、在藥物研發(fā)中，利用體外數據來預測人體內藥物代謝性質的早期ADME性質研究方法極大地提高了藥物開發(fā)的能力，但是，體外研究中復雜的影響因素直接影響了體外數據的真實性，進而對預測的準確性產生影響。因此，在藥物研發(fā)中，體外影響因素的研究對于開發(fā)出具有良好藥代動力學性質的藥物具有著重要意義。作為最重要的藥物代謝酶，CYP3A4參與了近50％臨床藥物的代謝，是這些藥物從體內清除的主要限速酶。CYP3A4的影響因素決定了體外研究中眾多化合物的代謝性質

2、能否準確預測。本文旨在探討非特異性結合對于CYP3A4酶促反應動力學的影響，完善CYP3A4的體外代謝模型，從而確保得到準確的藥物代謝動力學參數及進行體內藥物清除的準確預測。 本研究以CYP3A4的探針底物及其特異反應——睪酮6β羥基化和硝苯地平氧化反應來指示CYP3A4的活性，利用平衡透析和高效液相色譜法，對睪酮、硝苯地平在鼠肝微粒體和人肝微粒體體系中的非特異性結合進行了定性、定量分析。睪酮和硝苯地平與鼠肝和人肝微粒體體系均存

3、在較弱的非特異性結合，在鼠肝和人肝微粒體體系中二者的游離比例分別為：睪酮0.84±0.07和0.75±0.05，硝苯地平0.87±0.04和0.83±0.03。通過兩種微粒體體系的相互驗證，證明睪酮、硝苯地平與微粒體體系的非特異性結合均為等比例不可飽和的非特異性結合，即實驗體系中藥物的游離濃度和結合濃度均隨著加入藥物總濃度的增加而增加，但是游離比例基本保持不變。進一步就非特異性結合對CYP3A4催化的睪酮6β羥基化反應和硝苯地平氧化反應

4、動力學的研究顯示，排除非特異性結合影響后，兩個肝微粒體體系中，睪酮和硝苯地平原有的S形動力學曲線均左移、曲線形狀趨近于經典米氏方程的矩形雙曲線形狀，而且Eadie-Hofstee作圖均有直線化趨勢。同時利用Hill方程進行動力學參數的計算，Vmax和Hill系數n基本無變化，但S50卻被高估，進而導致對于藥物清除的預測Clmax的低估。 本研究表明，非特異性結合對于CYP3A4催化機理研究及代謝參數的正確評估具有重要作用。這提示