姜黃素逆轉(zhuǎn)肝癌耐藥性的體外實驗.pdf

1、目的： 原發(fā)性肝癌是當(dāng)今世界上最常見、惡性程度最高的腫瘤之一，目前肝癌治療首選根治性切除手術(shù)，局部或全身化療仍是治療肝癌一種常用手段，但肝癌化療失敗率高，主要原因是腫瘤對化療藥物存在在耐藥性。姜黃素是從姜科植物中藥姜黃的地下根莖中分離出來的主要活性物質(zhì)，具有廣泛的預(yù)防和治療腫瘤的作用，有報道發(fā)現(xiàn)姜黃素可作為腫瘤耐藥逆轉(zhuǎn)劑。本研究采用姜黃素作用于人肝細(xì)胞癌多藥耐藥株HepG2/ADM，觀測其有無逆轉(zhuǎn)肝癌耐藥性的作用。 方法

2、： 通過培養(yǎng)液中阿霉素濃度梯度遞增法，長期篩選建立人肝癌多藥耐藥細(xì)胞系HepG2/ADM，采用MTT法檢測其對6種抗癌藥物的耐藥性，免疫組化法檢測HepG2/ADM細(xì)胞與親本細(xì)胞P-gp的表達。鏡下觀察和MTT法檢測姜黃素對HepG2/ADM細(xì)胞耐藥性的逆轉(zhuǎn)作用。高效液相色譜法（HPLC）測定加用姜黃素后HepG2/ADM細(xì)胞內(nèi)ADM含量。 結(jié)果： HepG2/ADM細(xì)胞與HepG2細(xì)胞兩者生長曲線形態(tài)相似，He

3、pG2/ADM細(xì)胞倍增時間較HepG2細(xì)胞輕度延長。通過MTT法檢測6種抗癌藥物對兩組細(xì)胞的細(xì)胞毒作用，結(jié)果顯示在化療藥物作用48小時后，HepG2/ADM細(xì)胞的生存率均明顯高于HepG2細(xì)胞，觀察耐藥倍數(shù)發(fā)現(xiàn)HepG2/ADM細(xì)胞不僅對原誘導(dǎo)藥物ADM產(chǎn)生了耐藥，而且對另外四種藥物也出現(xiàn)交叉耐藥，即產(chǎn)生了多藥耐藥性。免疫組化法檢測兩組細(xì)胞P-gp的表達水平，HepG2/ADM細(xì)胞與HepG2細(xì)胞相比P-gp表達陽性染色率明顯增加（P<