復(fù)方何首烏浸膏對AD模型大鼠海馬腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子及絡(luò)氨酸激酶B mRNA表達(dá)的影響.pdf

1、背景與目的:阿爾茨海默病(Alzheimer disease，AD)是一種以進(jìn)行性記憶缺失和癡呆為臨床特點(diǎn)的大腦退行性病變疾病，是一種漸進(jìn)性的原發(fā)性的中樞性疾病，給社會和家庭帶來了沉重的負(fù)擔(dān)，醫(yī)學(xué)也對此難題耗費(fèi)了大量的人力和物力，但仍不能得到有效的根治?？上驳氖?，近年來中醫(yī)中藥在治療AD方面取得了較好的療效，本課題中復(fù)方何首烏浸膏就是在前人研究的基礎(chǔ)上以及大量的臨床實(shí)驗(yàn)中組方而成，以補(bǔ)腎活血化瘀祛痰開竅為組方原則，并在臨床實(shí)驗(yàn)中對120

2、例AD患者進(jìn)行了療效觀察，結(jié)果發(fā)現(xiàn)復(fù)方何首烏浸膏組總有效率為93.33％，較西藥與單味中藥何首烏組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，并且復(fù)方何首烏浸膏組能提高M(jìn)MSE評分，降低ADL評分，說明能很好的改善AD患者的記憶及認(rèn)知能力，提高患者的日常生活及社會活動能力[1]，綜上可見復(fù)方何首烏浸膏在臨床試驗(yàn)中已經(jīng)取得了較好的療效，但對于復(fù)方何首烏浸膏治療AD的可能作用機(jī)制，我們尚未進(jìn)行實(shí)驗(yàn)性的研究，為了能更好的應(yīng)用該方，本課題組決定對該

3、方進(jìn)行動物學(xué)的研究。故本課題組從補(bǔ)腎活血化瘀祛痰開竅方的組方原則出發(fā)，探討復(fù)方何首烏浸膏對在學(xué)習(xí)記憶能力和防止神經(jīng)元丟失中起重要作用的腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(brain derivedneurotrophic factor, BDNF)和其受體絡(luò)氨酸激酶B(Tyrosine kinasereceptor，TrkB)表達(dá)的影響，從而探討中藥復(fù)方何首烏浸膏防治阿爾茨海默病的部分作用機(jī)理，為臨床治療AD提供治療依據(jù)。
　　 方法:將40只

4、6月齡雄性SD大鼠隨機(jī)分為:正常組（A組）、假手術(shù)組（B組）、模型組（C組）、中藥復(fù)方何首烏浸膏治療組（D組）。模型組和中藥組大鼠雙側(cè)海馬注射β淀粉樣蛋白25-35(Aβ25-35)造模，假手術(shù)組同法注射等體積生理鹽水，正常組不作任何處理。并在造模后行Morris水迷宮試驗(yàn)(Morris water maze test，MWM)觀察造模是否成功。檢測后中藥組予補(bǔ)腎活血化瘀祛痰開竅方復(fù)方何首烏浸膏濃縮液灌胃治療8周，其他3組大鼠均予以等體

5、積雙蒸水對照灌胃，治療后再次進(jìn)行Morris水迷宮試驗(yàn)觀察各組大鼠學(xué)習(xí)記憶能力的改變，最后斷頭處死大鼠取雙側(cè)海馬組織，采用RT-PCR檢測海馬組織BDNF及其受體TrkB mRNA中的表達(dá)水平。
　　 結(jié)果:
　　 1.行為學(xué)檢測結(jié)果
　　 在隱匿平臺搜索實(shí)驗(yàn)及空間探索實(shí)驗(yàn)中:造模后，與A組相比，C、D組學(xué)習(xí)記憶能力顯著減退（逃避潛伏期延長、停留在平臺象限時(shí)間和穿越隱匿平臺位置的平均次數(shù)減少）;經(jīng)中藥干預(yù)治療后，

6、與C組相比較，D組學(xué)習(xí)記憶能力明顯增強(qiáng)（逃避潛伏期縮短、停留在平臺象限時(shí)間和穿越隱匿平臺位置的平均次數(shù)增加）。
　　 2.RT-PCR結(jié)果
　　 與A組相比較，C組BDNF及其受體TrkB mRNA和表達(dá)量明顯降低（P＜0.05），B組則無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05);與C組比較， D組BDNF及其受體TrkB mRNA表達(dá)量均上調(diào)(P＜0.05)。
　　 結(jié)論:
　　 1.大鼠雙側(cè)海馬區(qū)注射凝聚態(tài)的Aβ2