二苯乙烯苷對(duì)百草枯、代森錳誘導(dǎo)多巴胺能神經(jīng)元凋亡的保護(hù)作用.pdf

1、帕金森病(Parkinson's disease, PD)是一種常見(jiàn)于中老年的神經(jīng)系統(tǒng)變性疾病，其主要病理變化是含色素的神經(jīng)元變性、缺失，尤以黑質(zhì)致密部多巴胺(dopamine, DA) 能神經(jīng)元缺失為主。當(dāng)黑質(zhì)DA 能神經(jīng)元減少50％以上，紋狀體DA 遞質(zhì)減少超過(guò)80％時(shí)，出現(xiàn)以進(jìn)行性加重的運(yùn)動(dòng)緩慢、肌強(qiáng)直、靜止性震顫、姿勢(shì)步態(tài)異常、表情減少為特征的臨床表現(xiàn)。PD 的病因至今仍不十分清楚，但越來(lái)越多的研究支持環(huán)境、老齡和遺傳因素與PD

2、發(fā)病相關(guān)。 接觸農(nóng)用化學(xué)品，尤其是殺蟲(chóng)劑一直被認(rèn)為是誘導(dǎo)PD發(fā)病的危險(xiǎn)因素之一。MPTP，一種非法海洛因混合物的副產(chǎn)物，可誘導(dǎo)PD癥狀的產(chǎn)生，這一結(jié)論使對(duì)PD環(huán)境因素的研究備受關(guān)注。目前，已有報(bào)道證實(shí)多種殺蟲(chóng)劑在動(dòng)物模型中可誘導(dǎo)DA能神經(jīng)元的損傷。百草枯(paraquat, PQ)與MPTP活性代謝產(chǎn)物MPP+結(jié)構(gòu)的相似性使人們推測(cè)PQ可能是一種DA能的神經(jīng)毒劑。也有報(bào)道認(rèn)為接觸代森錳(maneb, MB)，一種廣泛使用的殺菌劑

3、，可誘發(fā)PD癥狀。此外，除了單獨(dú)使用MB對(duì)DA能神經(jīng)元具有毒性外，重復(fù)全身性給予小鼠MB和PQ的混合物可導(dǎo)致紋狀體DA含量減少，黑質(zhì)DA能神經(jīng)元的變性及動(dòng)物行為異常，兩者具有協(xié)同作用。現(xiàn)行的PD 治療方法不能阻止黑質(zhì)神經(jīng)元進(jìn)行性死亡和PD 病理發(fā)展。 因此，探索中醫(yī)藥保護(hù)黑質(zhì)DA 能神經(jīng)元的新方法，對(duì)于完善PD 治療十分必要。二苯乙烯苷(2,3,5,4-tetrahydroxystilbene-2-O-β-D-glucoside

4、, TSG)是何首烏的主要成分。近年來(lái)，TSG 的神經(jīng)保護(hù)作用逐漸受到人們的關(guān)注。研究證實(shí)TSG 可改善老年癡呆小鼠的學(xué)習(xí)記憶能力并能有效清除自由基，具有神經(jīng)保護(hù)作用，但是TSG 對(duì)PQ-MB 誘導(dǎo)的DA 能神經(jīng)元是否有保護(hù)作用，國(guó)內(nèi)外尚未見(jiàn)報(bào)道。本研究選擇PQ-MB 建立PD 模型，旨在觀察TSG對(duì)DA 能神經(jīng)元損傷是否具有保護(hù)作用，并對(duì)其有關(guān)作用機(jī)制做初步探討。 實(shí)驗(yàn)內(nèi)容如下： 實(shí)驗(yàn)一 目的：探討TSG 對(duì)P

5、Q-MB 誘導(dǎo)小鼠黑質(zhì)DA 能神經(jīng)元凋亡的保護(hù)作用。方法：酪氨酸羥化酶(TH)免疫組織化學(xué)法、尼氏(Nissl)染色。結(jié)果：空白對(duì)照組Nissl 陽(yáng)性神經(jīng)元及TH 陽(yáng)性神經(jīng)元分別為287.3±7.3、117.5±9.3。 TSG 組的Nissl 陽(yáng)性神經(jīng)元及TH 陽(yáng)性神經(jīng)元脫失減少，與模型組(104.1±9.6％)相比，Nissl 陽(yáng)性神經(jīng)元分別上升為113.4±7.4 (P>0.05)、174.7±6.6 (P<0.05)、2

6、66.2±10.2 (P<0.01)；與模型組(51.7±8.2)相比，TH 陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)分別上升為63.8±6.1 (P>0.05)、75.4±5.6 (P<0.05)、109.3±7.6(P<0.01)。結(jié)論：TSG 可抑制PQ-MB 誘導(dǎo)的小鼠黑質(zhì)DA 能神經(jīng)元凋亡。 實(shí)驗(yàn)二 目的：探討TSG 對(duì)PQ-MB 誘導(dǎo)黑質(zhì)DA 能神經(jīng)元凋亡保護(hù)作用的相關(guān)機(jī)制。方法：免疫組織化學(xué)染色檢測(cè)Caspase-3 的表達(dá)。結(jié)果：模型

7、組(42.5±5.2％)與空白對(duì)照組(9.9±7.2％)相比，Caspase-3 陽(yáng)性細(xì)胞比例明顯增加(P<0.01)，而這種激活可被TSG 所抑制。與模型組相比，TSG 組(40、80、160mg/kg) Caspase-3 陽(yáng)性細(xì)胞比例分別降至26.3±6.1％ (P<0.05)、18.7±4.9 ％(P<0.05)、15.4±5.8％ (P<0.01)。結(jié)論：TSG 對(duì)PQ-MB 誘導(dǎo)的黑質(zhì)DA 能神經(jīng)元凋亡具有保護(hù)作用，機(jī)制可能