mTORC1通過阻滯分化參與維持SSEA-4+高度惡性骨肉瘤細(xì)胞腫瘤干性的研究.pdf

1、第一部分、mTORC1通過阻滯分化參與維持SSEA-4+高度惡性骨肉瘤細(xì)胞腫瘤干性的研究
　　骨肉瘤是好發(fā)于兒童和青少年中最常見的骨腫瘤,被認(rèn)為是間充質(zhì)干細(xì)胞在分化過程中惡性轉(zhuǎn)變?yōu)閻盒阅[瘤干細(xì)胞而來。對化療不敏感的腫瘤干細(xì)胞導(dǎo)致約30-40％的患者在化療輔助手術(shù)后出現(xiàn)復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移。目前仍不能有效地區(qū)分并靶向治療骨肉瘤干細(xì)胞是治療失敗的根源。我們的結(jié)果顯示位于細(xì)胞表面的鞘糖脂分子SSEA-4可以富集惡性程度高的骨肉瘤干細(xì)胞，通過不同的

2、誘導(dǎo)分化模型證實SSEA-4+骨肉瘤細(xì)胞的比例隨分化的成熟而下降。在這個過程中AKT-mTORC1通路參與維持這群細(xì)胞的細(xì)胞干性，mTORC1的活性與SSEA-4的表達(dá)強度直接相關(guān)。抑制
　　mTORC1組分Raptor和下游底物S6K而不是mTORC2組分Rictor，會導(dǎo)致細(xì)胞SSEA-4表達(dá)比例的下降并促使他們丟失干性分化成熟。在體內(nèi)外模型中使用mTOR抑制劑RAD001顯著抑制了細(xì)胞的SSEA-4表達(dá)強度和腫瘤重建能力。對

3、受mTORC1負(fù)調(diào)控的細(xì)胞周期抑制子p27的沉默可以部分恢復(fù)骨肉瘤細(xì)胞SSEA-4的表達(dá)和體內(nèi)外的致瘤力。我們的結(jié)果提示臨床可以通過靶向AKT-mTOR通路治療SSEA-4高表達(dá)的骨肉瘤病人。
　　第二部分Rig-I通過參與調(diào)控DNA損傷應(yīng)答通路維持造血干細(xì)胞的功能
　　位于造血頂端的造血干細(xì)胞通過維持自身自我更新和多能分化的潛能以維系造血系統(tǒng)的穩(wěn)定。本研究以Rig-I缺失小鼠（Rig-I－／－）作為動物模型，對生理條件及電

4、離輻射刺激條件下Rig-I缺失小鼠和同系野生型小鼠各系造血細(xì)胞進行免疫表型的檢測分析，結(jié)果顯示Rig-I的缺失增加了造血干細(xì)胞的數(shù)量，并且擾亂了造血干細(xì)胞的分布比例。與同系野生型小鼠相比，Rig-I缺失小鼠對急性/慢性輻照敏感度增加，生存率下降伴造血干細(xì)胞耗竭。進一步檢測發(fā)現(xiàn)生理和輻照應(yīng)激條件下Rig-I缺失引起造血干細(xì)胞ROS的升高和γH2AX水平的改變。在體外利用敲低Rig-I的MEF細(xì)胞系也觀察到γH2AX水平的下降。我們的結(jié)果提