2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、本研究從自然界中分離篩選出一株高產(chǎn)殼聚糖酶的微生物菌株,經(jīng)鑒定為Aspergillusfumigams。通過誘變選育,獲得了菌株AspergillusfumigatusJxsd-97,并對其發(fā)酵產(chǎn)酶條件進行優(yōu)化,研究確定其最適產(chǎn)酶培養(yǎng)基組分為(‰w/v):殼聚糖1.6,蛋白胨0.4,MgS04·7H200.04,KH2P040.04,KCl0.05,F(xiàn)eS04·7H200.001,起始pH為5.0;最適產(chǎn)酶培養(yǎng)條件是:250mL搖瓶裝液

2、量為50mL,培養(yǎng)溫度為28*(2,接種量為0.6mL,培養(yǎng)時間為96h。在最適產(chǎn)酶培養(yǎng)條件下,發(fā)酵液中殼聚糖酶活力可達到9.35U/mL。采用75%乙醇分級沉淀、透析(分子量:8000~14400)、SP-SepharoseFF離子交換層析對菌AsspergillusfumigatusJxsd-97發(fā)酵液中的殼聚糖酶進行分離提純,獲得了SDS-PAGE呈單條帶的殼聚糖酶,分子量為25kD。對該酶進行了酶學性質的研究,利用薄層層析分析確

3、認酶解產(chǎn)物為殼寡糖,不含氨基葡萄糖,證明了該酶為內(nèi)切殼聚糖酶。該殼聚糖酶的最適溫度和最適pH分別為63'(2和pH5.8,酶活力在pH4.5~8.0范圍內(nèi)和45*(2以下時相對穩(wěn)定;金屬離子Mn2+對內(nèi)切殼聚糖酶有強烈的激活作用,而Hg2+,Ag+,F(xiàn)e3+,Cd2+,pb2+則有強烈抑制作用。對內(nèi)切殼聚糖酶的N.端氨基酸序列進行測定,結果為YNLPNNLKQ。N.端氨基酸序列的測定,為克隆表達該殼聚糖酶的基因做好了準備。 研究

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