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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:通過建立雄性糖尿病大鼠生殖損傷的模型,觀察氟伐他汀對(duì)糖尿病大鼠睪丸損傷的保護(hù)作用,并探討氟伐他汀對(duì)糖尿病大鼠睪丸損傷保護(hù)作用的可能機(jī)制。
方法:選用SPF級(jí)雄性SD大鼠86只,隨機(jī)取10只做為正常對(duì)照組,其余大鼠均腹腔注射STZ(65mg/kg)誘導(dǎo)糖尿病大鼠模型。將造模成功大鼠按血糖、體重均勻分為糖尿病模型對(duì)照組(DM)、氟伐他?。?、18mg/kg)組和胰島素組。氟伐他汀組每天灌胃1次,正常對(duì)照組及糖尿病模型組給予等
2、體積生理鹽水灌胃,胰島素組給予精蛋白鋅胰島素皮下注射2U·kg-1·d-1,連續(xù)給藥8周。8周末,處死動(dòng)物,留取血清及睪丸組織,行血清睪酮(T)、睪丸組織MDA、SOD、GSH-Px檢測(cè),并在光鏡下觀察HE染色、TUNEL染色及免疫組織化學(xué)(Bcl-2,Bax)等指標(biāo),透射電鏡下觀察睪丸組織超微結(jié)構(gòu)改變。
結(jié)果:
1.氟伐他汀對(duì)糖尿病大鼠一般情況的影響:實(shí)驗(yàn)期間,糖尿病模型組大鼠除“三多一少”現(xiàn)象外,還出現(xiàn)多系統(tǒng)并發(fā)
3、癥的表現(xiàn),死亡較多(41.6%);與糖尿病組比較,氟伐他汀各劑量組對(duì)外界反應(yīng)相對(duì)靈敏,并發(fā)癥程度較輕,死亡相對(duì)較少(36.4%和27.3%);胰島素組大鼠的一般情況明顯改善,死亡較少(27.3%)。
2.氟伐他汀對(duì)糖尿病大鼠血糖、體重的影響:經(jīng)8周藥物干預(yù)后,糖尿病組大鼠空腹血糖顯著高于正常組(P<0.01);氟伐他汀各組空腹血糖較糖尿病組有不同程度的下降(P<0.01);胰島素組與正常組空腹血糖無顯著性差異(P>0.05)。
4、與正常組相比,糖尿病組大鼠體重顯著減輕(P<0.01);氟伐他汀各組與糖尿病組大鼠體重?zé)o顯著性差異(P>0.05);胰島素組大鼠體重較糖尿病組顯著增加(P<0.01),但不及正常組(P<0.01)。
3.氟伐他汀對(duì)糖尿病大鼠睪丸質(zhì)量、睪丸臟器系數(shù)的影響:糖尿病組大鼠睪丸質(zhì)量、臟器系數(shù)較正常組顯著降低(P<0.01);氟伐他汀各組睪丸質(zhì)量及臟器系數(shù)高于糖尿病組,且18mg/kg組與糖尿病組存在顯著性差異(P<0.01);胰島素組
5、大鼠睪丸質(zhì)量低于正常組(P<0.01),但兩組臟器系數(shù)無顯著性差異(P>0.05)。
4.氟伐他汀對(duì)糖尿病大鼠精子參數(shù)的影響:糖尿病組大鼠精子數(shù)量、精子活率顯著少于正常組(P<0.01);氟伐他汀6mg/kg組精子數(shù)量、精子活率與糖尿病組無顯著性差異(P>0.05),氟伐他汀18mg/kg組精子數(shù)量、精子活率均較糖尿病組顯著增高(P<0.05或P<0.01),但不及胰島素組(P<0.01)。胰島素組精子數(shù)量、精子活率低于正常組
6、(P<0.01)。
5.氟伐他汀對(duì)糖尿病大鼠睪丸組織HE染色的影響:光鏡下,正常組大鼠睪丸曲細(xì)精管飽滿,各級(jí)生精細(xì)胞排列整齊,管腔內(nèi)可見密集精子;糖尿病模型組大鼠曲細(xì)精管明顯萎縮,生精細(xì)胞脫落、數(shù)量顯著減少,大部分管腔內(nèi)未見精子;氟伐他汀組曲細(xì)精管結(jié)構(gòu)基本完整,6mg/kg組管腔內(nèi)可見精子細(xì)胞核分裂像,18mg/kg組管腔內(nèi)可見少量精子;胰島素組曲細(xì)精管及各級(jí)生精細(xì)胞形態(tài)基本正常,管腔內(nèi)可見較多精子。
6.氟伐他汀對(duì)
7、糖尿病大鼠睪丸生精細(xì)胞TUNEL染色的影響:凋亡細(xì)胞表達(dá)糖尿病組最多,并顯著高于其余各組(P<0.01);氟伐他汀干預(yù)后,凋亡生精細(xì)胞數(shù)量較糖尿病組明顯減少(P<0.01),且18mg/kg組優(yōu)于6mg/kg組,但不及胰島素組;胰島素組凋亡細(xì)胞數(shù)量與正常組相近(P>0.05)。
7.氟伐他汀對(duì)糖尿病大鼠睪丸組織電鏡下超微結(jié)構(gòu)的影響:糖尿病組大鼠睪丸間質(zhì)細(xì)胞體積縮小,細(xì)胞質(zhì)減少,線粒體減少、嵴溶解,內(nèi)質(zhì)網(wǎng)擴(kuò)張,脂滴增加,間質(zhì)細(xì)胞
8、核固縮,染色質(zhì)呈塊狀濃集;間質(zhì)微血管內(nèi)皮細(xì)胞增生、腫脹,基底膜顯著增厚,可見大量纖維素樣物質(zhì)沉積。氟伐他汀組間質(zhì)細(xì)胞細(xì)胞器增多,線粒體嵴結(jié)構(gòu)較清晰,內(nèi)質(zhì)網(wǎng)增多,脂滴減少,細(xì)胞核染色質(zhì)濃集、邊集現(xiàn)象好轉(zhuǎn);間質(zhì)微血管管腔通暢,血管內(nèi)皮細(xì)胞形態(tài)明顯好轉(zhuǎn),血管基底膜增厚現(xiàn)象明顯減輕,纖維素樣沉積明顯減少,且18mg/kg組優(yōu)于6mg/kg組,接近于正常組。胰島素組間質(zhì)細(xì)胞、間質(zhì)微血管超微結(jié)構(gòu)與正常組接近。
8.氟伐他汀對(duì)糖尿病大鼠血清
9、睪酮的影響:糖尿病組大鼠睪酮水平較正常組顯著降低(P<0.01)。氟伐他汀18mg/kg組睪酮水平較糖尿病組顯著增高(P<0.01),但不及胰島素組;胰島素組睪酮水平低于正常組(P<0.05)。
9.氟伐他汀對(duì)糖尿病大鼠睪丸組織SOD、GSH-PX活性和MDA含量的影響:與正常組大鼠相比,糖尿病模型組大鼠SOD水平顯著降低(P<0.01)、GSH-PX、MDA水平顯著增高(P<0.01);與糖尿病組大鼠相比,氟伐他汀各組SOD
10、水平顯著增高(P<0.01或P<0.05),GSH-PX水平、MDA水平顯著下降(P<0.05或P<0.01);氟伐他汀各組SOD、GSH-PX、MDA水平與胰島素組間無顯著性差異(P>0.05)。
10.氟伐他汀對(duì)糖尿病大鼠睪丸生精細(xì)胞Bax,Bcl-2免疫組化陽(yáng)性細(xì)胞表達(dá)的影響:在正常組中,Bcl-2表達(dá)最明顯,Bax表達(dá)最少,而糖尿病組較其余各組Bcl-2表達(dá)顯著減少(P<0.01),Bax表達(dá)顯著增加(P<0.01);
11、氟伐他汀治療組較糖尿病組Bcl-2表達(dá)顯著增加,Bax表達(dá)顯著減少(P<0.01),且18mg/kg組優(yōu)于6mg/kg組。胰島素組較氟伐他汀組Bcl-2表達(dá)增加、Bax表達(dá)減少(P<0.01),但與正常組比較還存在顯著性差異(P<0.01)。
結(jié)論:
1.氟伐他汀可減輕糖尿病大鼠的睪丸損傷,對(duì)睪丸組織具有保護(hù)作用。
2.氟伐他汀對(duì)糖尿病大鼠睪丸損傷的保護(hù)作用機(jī)制可能與減輕糖尿病大鼠睪丸組織氧化應(yīng)激水平以及調(diào)
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