骨源骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞對(duì)實(shí)驗(yàn)性自身免疫性甲狀腺炎的治療效果及對(duì)IFN-γ與IL-17影響的研究.pdf

1、目的：
　　1.利用C57BL/6小鼠建立橋本氏甲狀腺炎(hashimoto'sthyroiditis，HT)的小鼠模型-實(shí)驗(yàn)性自身免疫性甲狀腺炎(experimentalautoimmunethyroiditis，EAT)，使其具有甲狀腺自身抗體水平升高、甲狀腺組織淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)的特征。
　　2.分離培養(yǎng)健康C57BL/6小鼠骨鏈間充質(zhì)干細(xì)胞(bonemarrowmesenchyrmalstemcells，BMSCs)并對(duì)E

2、AT小鼠利用BMSCs進(jìn)行尾靜脈注射治療，通過(guò)對(duì)治療組及對(duì)照組小鼠檢測(cè)血清TT3、TT4、甲狀腺球蛋白抗體(Thyroglobulinantibody，TgAb)、甲狀腺過(guò)氧化物酶抗體(Antithyroidperoxidaseantibodies，TPOAb)、甲狀腺微粒體抗體(ThyroidmicrosomalAutoantibody，TMAb)及甲狀腺病理并對(duì)結(jié)果進(jìn)行分析比較，初步探討同源BMSCs對(duì)EAT的治療效果。
　　

3、3.通過(guò)分析比較模型組與對(duì)照組小鼠干擾素γ(Interferon-γ，IFN-γ)與IL-17(Interleukine-17，IL-17)水平的差異以及BMSCs治療后的變化探討EAT的相關(guān)發(fā)病機(jī)理及BMSCs控制自身免疫反應(yīng)的作用機(jī)制。
　　方法：6周齡雌性C57BL/6小鼠36只，體重(20±1)g，隨機(jī)分為模型治療組(A組)、單純模型組(B組)、正常對(duì)照組(C組)共三組，每組均為12只小鼠。于第0天用豬甲狀腺免疫球蛋白(P

4、orcineThyroglobulin，PTg)及完全弗氏佐劑(Freund'sadjuvantcomplete，CFA)對(duì)A組和B組進(jìn)行初次免疫，于第14天用PTg及不完全弗氏佐劑(Freund'sadjuvantincomplete，IFA)對(duì)A組和B組進(jìn)行再次免疫。并對(duì)A組于第0天，第7天、第14天、第21天進(jìn)行BMSCs尾靜脈注射治療。BMSCs來(lái)自于同源C57BL/6小鼠，經(jīng)分離、培養(yǎng)、傳代、鑒定，獲得純化P3代BMSCs用于

5、實(shí)驗(yàn)研究。三組小鼠均于實(shí)驗(yàn)第28天摘眼球取血，測(cè)血清TT3、TT4、TgAb、TPOAb、TMAb、IFN-γ、IL-17水平，處死小鼠后分離甲狀腺組織，隨后進(jìn)行甲狀腺組織HE染色及組織病理分析其甲狀腺淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)程度。
　　結(jié)果：
　　1.A組血清TgAb、TPOAb、TMAb水平及甲狀腺濾泡淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)程度較C組高，差異存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；B組TgAb、TPOAb、TMAb水平及甲狀腺濾泡淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)程度較C

6、組高，差異存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；A、B組TT4低于A組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；A組與B組、C組三組間比較TT3差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。
　　2.A組與B組比較TgAb、TPOAb、TMAb水平以及甲狀腺濾泡淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)程度低，TT4較B組高，差異存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05)。
　　3.A組、B組、C組三組間血清IFN-γ、IL-17水平相比差異存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，B組水平明顯高

7、于A組及C組，而A組水平明顯高于C組(P<0.05)。
　　4.A組血清IFN-γ、IL-17水平與TPOAb水平存在正相關(guān)(P<0.05)，B組血清IFN-γ、IL-17水平與TPOAb水平存在正相關(guān)(P<0.05)。
　　結(jié)論：
　　1.A組及B組小鼠經(jīng)兩次甲狀腺球蛋白聯(lián)合佐劑皮下免疫誘導(dǎo)后，實(shí)驗(yàn)結(jié)束血清TgAb、TPOAb、TMAb水平較正常組小鼠水平高，TT4較正常組低，并且甲狀腺病理顯示濾泡間質(zhì)存在淋巴細(xì)胞浸

8、潤(rùn)情況，具有典型EAT特征，提示免疫誘導(dǎo)造模成功。
　　2.A組小鼠甲狀腺自身抗體-TgAb、TPOAb、TMAb水平，促炎細(xì)胞因子IFN-γ、IL-17水平，甲狀腺組織淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)程度低于B組，TT4高于B組，提示同源BMSCs對(duì)EAT小鼠具有治療作用，保護(hù)甲狀腺組織抵抗免疫誘導(dǎo)損傷，防止自身免疫破壞作用。但BMSCs對(duì)EAT詳細(xì)的作用機(jī)理仍有待于進(jìn)一步探索。
　　3.A組及B組血清IFN-γ、IL-17細(xì)胞因子水平均高于