巨噬細(xì)胞移動(dòng)抑制因子與胰腺癌關(guān)系的研究.pdf

1、目的研究MIF在正常胰腺及胰腺癌組織中的分布情況;研究MIF與胰腺癌臨床分期與病理分級(jí)的關(guān)系;研究MIF在胰腺癌細(xì)胞系中的表達(dá)情況.構(gòu)建MIF RNA干擾載體導(dǎo)入胰腺癌細(xì)胞,建立穩(wěn)定表達(dá)MIF RNA干擾表達(dá)的胰腺癌細(xì)胞系.進(jìn)一步研究MIF對(duì)胰腺癌細(xì)胞生長的影響;方法免疫組織化學(xué)方法研究胰腺癌、正常胰腺組織中MIF蛋白的表達(dá);免疫細(xì)胞化學(xué)方法研究胰腺癌細(xì)胞系MIF蛋白的表達(dá);RT-PCR技術(shù)研究胰腺癌細(xì)胞MIF基因的表達(dá);構(gòu)建MIF R

2、NA干擾載體pRNAH1-MIF,脂質(zhì)體法將質(zhì)粒pRNAH1-MIF導(dǎo)入胰腺癌細(xì)胞系A(chǔ)SPC-1、PANC-1中.經(jīng)Zeocin篩選得到抗性克隆siRNA-MIF-ASPC-1、siRNA-MIF-PANC-1,轉(zhuǎn)移擴(kuò)增建立穩(wěn)定的MIF knockdown細(xì)胞系.MTT法檢測(cè)轉(zhuǎn)染后胰腺癌細(xì)胞系的增殖活性.免疫細(xì)胞化學(xué)、RT-PCR、Westernblot技術(shù)研究轉(zhuǎn)染后胰腺癌細(xì)胞系MIF的表達(dá)情況.結(jié)論MIF在胰腺癌組織中高表達(dá),且與腫瘤