脫氧雪腐鐮刀菌烯醇對(duì)人正常食管鱗狀上皮細(xì)胞抗原提呈相關(guān)分子及凋亡影響的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、河北醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文脫氧雪腐鐮刀菌烯醇對(duì)人正常食管鱗狀上皮細(xì)胞抗原提呈相關(guān)分子及凋亡影響的實(shí)驗(yàn)研究姓名：孫巍申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：病理學(xué)與病理生理學(xué)指導(dǎo)教師：李月紅張祥宏20090301中文摘要核細(xì)胞抗原提呈分子的表達(dá)。因此，認(rèn)為細(xì)胞HLAabc分子表達(dá)降低，可能有助于細(xì)胞逃避免疫監(jiān)視，使癌變發(fā)生成為可能。但有關(guān)DON對(duì)食管鱗狀上皮細(xì)胞直接作用的研究，國(guó)內(nèi)外尚未見文獻(xiàn)報(bào)道。本研究運(yùn)用細(xì)胞培養(yǎng)，免疫細(xì)胞化學(xué)，流式細(xì)胞定量檢測(cè)，Wes

2、ternblot，RTPCR方法檢測(cè)了不同劑量DON處理24小時(shí)后，原代培養(yǎng)的正常食管鱗狀上皮細(xì)胞HLAabe、TAP1、LMP2、ERK和PERK蛋白表達(dá)變化情況，同時(shí)檢測(cè)了細(xì)胞凋亡，探討分析了DON對(duì)正常食管鱗狀上皮細(xì)胞抗原提呈分子的影響規(guī)律和對(duì)細(xì)胞凋亡的可能影響。從免疫角度探討DON對(duì)機(jī)體免疫功能的可能影響，初步揭示DON暴露在我國(guó)食管癌高發(fā)區(qū)腫瘤發(fā)生發(fā)展中的可能作用。方法：l成人食管鱗狀上皮細(xì)胞原代培養(yǎng)將取材的正常食管粘膜，在無

3、菌條件下反復(fù)沖洗。置于1640培養(yǎng)液中，盡量剪除粘膜下血管和結(jié)締組織，將粘膜剪成2mm2左右的小塊。置于涂布胎牛血清的培養(yǎng)瓶中，粘膜面均朝上，加入少量DMEM：F12(1：1)混合培養(yǎng)基，使組織塊濕潤(rùn)，在48小時(shí)內(nèi)將瓶中的培養(yǎng)基加到2ml。37℃5％C02的培養(yǎng)箱培養(yǎng)。以后每2—3天換液一次。21天上皮細(xì)胞可布滿瓶底。2食管鱗狀上皮細(xì)胞的鑒定倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞細(xì)胞形態(tài)和生長(zhǎng)情況，細(xì)胞爬片后用廣譜CK進(jìn)行免疫細(xì)胞化學(xué)染色，鑒定細(xì)胞來源。