糖基化終產(chǎn)物對視網(wǎng)膜VEGF及Flk-1表達(dá)的影響.pdf

1、目的: 糖尿病視網(wǎng)膜病變(DR)是常見致盲眼病之一，其發(fā)生和進(jìn)展與血糖水平、疾病病程、遺傳及控制情況等多種因素有關(guān)。對于DR的發(fā)病機(jī)制，目前的研究主要集中在高血糖、多元醇代謝異常、蛋白質(zhì)非酶糖化、血流動(dòng)力學(xué)異常、細(xì)胞因子等方面。長期高血糖引起機(jī)體蛋白質(zhì)非酶糖化所形成的糖基化終產(chǎn)物(AGEs)大量堆積是導(dǎo)致DR發(fā)生的主要原因。DR的實(shí)質(zhì)是進(jìn)展性的微血管病變，新生血管形成是其特征性的病理改變。在血管新生的過程中，血管內(nèi)皮生長因子(V

2、EGF)通過其受體起重要作用。本實(shí)驗(yàn)通過觀察AGEs對健康大鼠視網(wǎng)膜VEGF及其受體(flk-1)表達(dá)的影響，探討AGEs與VEGF及flk-1之間內(nèi)在關(guān)系，以及AGEs在DR發(fā)病過程中的重要作用。 方法: 1、體外制備AGEs，BSA 50g/l和D-glucose 0.5mol/l溶于0.2mol/l PH 7.4 PBS中。對照組不含D-glucose，余同。37℃溫育三個(gè)月。三個(gè)月后取出，透析。經(jīng)熒光分光光度法鑒

3、定。 2、20只SD大鼠隨機(jī)分為AGEs實(shí)驗(yàn)組和BSA對照組，每組10只。分別于鼠尾靜脈以40mg/kg·d的劑量注射AGEs和BSA，每日1次，連續(xù)2周。 3、二周后處死大鼠，視網(wǎng)膜行免疫組織化學(xué)染色，計(jì)數(shù)視網(wǎng)膜VEGF及flk-1的表達(dá)。 結(jié)果: 1、體外孵育產(chǎn)物經(jīng)熒光分光光度法鑒定，實(shí)驗(yàn)組產(chǎn)物熒光值為52.67U/mg，對照組產(chǎn)物熒光值為5.65U/mg。 2、大鼠血糖平均值，AGEs組[(

4、5.153±0.148)mmol/1]與BSA組[(5.130±0.112)mmol/l]無統(tǒng)計(jì)學(xué)差別。 3、視網(wǎng)膜節(jié)細(xì)胞層和內(nèi)核層出現(xiàn)的棕黃色染色的VEGF陽性細(xì)胞數(shù)，AGEs組[(31.277±6.963)個(gè)]較BSA對照組[(20.986±5.838)個(gè)]多。 4、視網(wǎng)膜節(jié)細(xì)胞層和內(nèi)核層出現(xiàn)的淡黃色染色的flk-1陽性細(xì)胞數(shù)，AGEs組[(2.175±0.677)個(gè)]較BSA對照組[(1.756±0.493)個(gè)]多