沙立度胺及與順鉑聯(lián)合對(duì)Hela細(xì)胞影響的研究.pdf

1、目的：宮頸癌是一種嚴(yán)重危害婦女健康的惡性腫瘤。近年來(lái)化療的地位不斷提高，而化療藥物中的順鉑是首選，但是大劑量化療藥物所帶來(lái)的嚴(yán)重的副作用及耐藥反應(yīng)對(duì)化療的療效構(gòu)成挑戰(zhàn)，減少化療藥物的用量及克服耐藥將成為提高進(jìn)展型宮頸癌5年生存率的關(guān)鍵。因此，尋找增加化療藥物的敏感性的途徑就顯的極其重要。 本實(shí)驗(yàn)采用MTT法測(cè)定沙立度胺單獨(dú)及與順鉑聯(lián)合對(duì)人宮頸癌Hela細(xì)胞體外生長(zhǎng)的增殖抑制作用，采用流式細(xì)胞儀分析對(duì)細(xì)胞周期、凋亡的影響，旨在進(jìn)一

2、步探討沙立度胺及與順鉑聯(lián)合對(duì)人宮頸癌Hela細(xì)胞株體外生長(zhǎng)及對(duì)其凋亡、細(xì)胞周期的影響，及采用免疫細(xì)胞化學(xué)法研究沙立度胺對(duì)bcl-2蛋白的影響。為沙立度胺在宮頸癌治療中的應(yīng)用以及與其它藥物聯(lián)合應(yīng)用提供理論支持，為宮頸癌聯(lián)合化療開(kāi)辟一條新思路。 方法： 1.研究對(duì)象：人宮頸癌Hela細(xì)胞株。 2.MTT法測(cè)定藥物對(duì)Hela細(xì)胞生長(zhǎng)的抑制率。分為4個(gè)試驗(yàn)組：(1)對(duì)照組只加培養(yǎng)液。(2)沙立度胺組加入用培養(yǎng)液稀釋的終濃

3、度為400mg/L、200 mg/L、100 mg/L、50 mg/L、25mg/L、12.5 mg/L、6.25 mg/L沙立度胺溶液。(3)順鉑組加入用培養(yǎng)液稀釋的終濃度為5mg/L、2.5mg/L、1mg/L、0.5mg/L的順鉑溶液。(4)聯(lián)合組加入用培養(yǎng)液稀釋的終濃度為、100 mg/L、50 mg/L、25 mg/L、12.5 mg/L、6.25 mg/L沙立度胺溶液和終濃度為2.5mg/L的順鉑溶液。每個(gè)濃度設(shè)置3個(gè)復(fù)孔，

4、48小時(shí)后測(cè)定吸光度值。試驗(yàn)重復(fù)3次。 3.流式細(xì)胞儀測(cè)定藥物對(duì)細(xì)胞周期及凋亡的影響。采用100 mg/I。、50mg/L、6.25 mg/L沙立度胺，聯(lián)合組采用1mg/L的順鉑，分組同上，48小時(shí)后用流式細(xì)胞儀分析細(xì)胞周期及凋亡的影響。試驗(yàn)重復(fù)4次。 4.免疫細(xì)胞化學(xué)法測(cè)定沙立度胺對(duì)抑凋亡基因bcl-2表達(dá)蛋白的影響。分為2組：(1)對(duì)照組只加入培養(yǎng)液(2)沙立度胺組加入用培養(yǎng)液稀釋的終濃度為100 mg/L、50