螺內(nèi)酯對百草枯中毒大鼠肺纖維化的干預作用及其作用機制的實驗研究.pdf

1、實驗目的：
　　 本研究通過一次性灌胃建立百草枯(Paraquat，PQ)中毒大鼠肺纖維化模型，觀察螺內(nèi)酯能否阻抑PQ中毒大鼠肺纖維化，以揭示PQ中毒致肺纖維化部分機理及初步探討其可能的干預機制。
　　 實驗方法：
　　 63只健康成年雄性SD大鼠隨機分為三組：正常對照組(Control組)、百草枯染毒組(Paraquat，PQ組)、百草枯+螺內(nèi)酯治療組(Paraquat+Spironolactone，PQ+SP

2、I組)。各組大鼠按觀察時點7d、14d、28d隨機又分成三個亞組，每亞組7只。PQ組和PQ+SPI組大鼠于實驗開始一次性PQ(80mg/kg)灌胃染毒而Control組給予2ml生理鹽水灌胃。灌胃后2小時，PQ+SPI組大鼠每日予以螺內(nèi)酯(Spironolactone，100mg/kg)1次灌胃干預，而PQ組和Control組則予以生理鹽水2ml灌胃。各組大鼠分別于造模后第7d、14d、28d處死，處死前開胸獲取血及肺組織，記錄各時點各

3、組大鼠體重、肺濕重以比較體重變化及肺系數(shù)。取右肺組織進行HE染色、Masson染色觀察形態(tài)學變化且取左肺部分組織測定羥脯氨酸(hydroxyproline，HYP)含量的變化以判定肺損傷、肺纖維化的程度；用放射免疫分析法檢測血漿及左肺剩余組織醛固酮(Aldosterone，ALD)的含量；用免疫組織化學方法檢測轉(zhuǎn)化生長因子-β1(TGF-β1)、α-平滑肌肌動蛋白(α-SMA)在各組大鼠肺組織中的表達，并用圖像分析半定量測定TGF-β1

4、、α-SMA陽性表達的平均光密度。
　　 實驗結(jié)果：
　　 (1)PQ組大鼠染毒后中毒反應重，體重增量明顯減少，各時點肺泡炎、肺纖維化程度積分及肺系數(shù)、肺組織中HYP含量均較Control組明顯增高(P＜0.01)。各時點血漿及肺組織中ALD含量均明顯高于Control組，第14d始差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。肺組織各時點TGF-β1、α-SMA蛋白表達的MOD值均高于Control組及PQ+SPI組，第14d始差

5、異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05或P＜0.01)。
　　 (2)PQ+SPI組大鼠染毒后中毒表現(xiàn)較PQ組輕，體重增量也較PQ組少，各時點肺組織病理變化與PQ組相似，但程度有所減輕，各時點肺泡炎、肺纖維化程度積分均較PQ組有所減輕(P＜0.05或P＜0.01)。各時點肺系數(shù)、肺組織中HYP含量均高于Control組，但較PQ組均有所降低(P＜0.01)。各時點血漿及肺組織中ALD水平均較同時間點PQ組和Control組升高，第14d始

6、差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。肺組織各時點TGF-β1蛋白表達的MOD值均高于Control組，但較PQ組明顯降低，差異均有統(tǒng)計學意義(P＜0.05或P＜0.01)。肺組織第7d時α-SMA蛋白表達的MOD值與PQ組和Control組相比，均無顯著統(tǒng)計學差異(P＞0.05)，第14d始差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.01)。
　　 結(jié)論：
　　 通過一次性PQ(80mg/kg)灌胃染毒可成功建立PQ中毒致肺纖維化大鼠模型，