β族胸腺素和前胸腺素α在人膀胱移行細(xì)胞癌中的表達(dá)和意義.pdf

1、目的: 前胸腺素α是一種存在于所有哺乳動(dòng)物組織中并且高度保守的天然無結(jié)構(gòu)、強(qiáng)酸性小分子蛋白質(zhì)，具有重要的生物學(xué)功能。β族胸腺素是一種刺激細(xì)胞運(yùn)動(dòng)的物質(zhì)。它在多種腫瘤組織中表達(dá)明顯升高，其表達(dá)上調(diào)與轉(zhuǎn)移潛在性正相關(guān)。國內(nèi)外對于前胸腺素α和β族胸腺素在膀胱癌中的表達(dá)及相關(guān)性的研究甚少。本次實(shí)驗(yàn)就是通過免疫組織化學(xué)方法來研究前胸腺素α和β族胸腺素在膀胱癌中的表達(dá)，并對其在膀胱癌的診斷和治療中的意義進(jìn)行展望。 對象和方法:

2、 1.材料 實(shí)驗(yàn)標(biāo)本選用天津醫(yī)科大學(xué)第二附屬醫(yī)院1995年4月至2001年4月手術(shù)切除的86例膀胱粘膜組織存檔蠟塊，并經(jīng)病理證實(shí)。 2.臨床及病理資料患者術(shù)前均未行放療、化療與免疫治療。其中膀胱移行細(xì)胞癌76例，男56例，女20例：年齡35—86歲，平均54.8歲。按照WHO膀胱腫瘤組織學(xué)分類標(biāo)準(zhǔn)(1999)分級：G124例，G228例，G324例；TNM分期：Ta-126例；T2-450例。正常膀胱粘膜10例，均為前

3、列腺增生開放性手術(shù)時(shí)留取，均為男性，年齡48—72歲，平均58.4歲。2組間年齡(F=3.72)、性別(F=2.63)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 3.主要試劑 胸腺素β4、胸腺素β10、胸腺素β15、前胸腺素α和CD34的兔抗人多克隆抗體(一抗)，購白天津潤泰科技發(fā)展有限公司。 4.方法 免疫組織化學(xué)染色，采用SABC法檢測了76例膀胱移行細(xì)胞癌組織及10例正常膀胱粘膜的Tβ4、Tβ10、Tβ15、ProTα和C

4、D34蛋白表達(dá)，并計(jì)數(shù)微血管密度。用PBS代替一抗作陰性對照。結(jié)果判定：細(xì)胞漿中出現(xiàn)棕黃色為陽性顯色，用染色強(qiáng)度和陽性細(xì)胞指數(shù)進(jìn)行綜合判定。 5.統(tǒng)計(jì)與分析采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件對實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)處理，三組樣本以上計(jì)量資料用方差分析，多樣本均數(shù)間的多重比較用Dunnett-t檢驗(yàn)，計(jì)量資料用Pearson相關(guān)分析，計(jì)數(shù)資料用卡方檢驗(yàn)分析。以P<0.05為差異有顯著性。檢驗(yàn)水準(zhǔn)：雙側(cè)α=0.05。 結(jié)果: 1

5、.76例膀胱移行細(xì)胞癌組織中：Tβ4、Tβ10、Tβ15和ProTα蛋白表達(dá)陽性物質(zhì)呈棕黃色細(xì)顆粒狀，主要定位于膀胱癌癌細(xì)胞和膀胱粘膜上皮細(xì)胞胞漿，也見于脈管內(nèi)皮細(xì)胞及間質(zhì)細(xì)胞。全部的76例膀胱移行細(xì)胞癌組織，Tβ4、Tβ10、Tβ15和ProTα高表達(dá)率分別為88.2％(67/76)、28.9％(22/76)、76.3％(58/76)和86.8％(66/76)。10例正常膀胱粘膜組織中均無表達(dá)或低表達(dá)。 2.Tβ4、Tβ15和

6、ProTα在膀胱癌組織的高表達(dá)率與膀胱癌的分期分級有明顯相關(guān)性，Tβ10只與膀胱癌的分期有相關(guān)性。ProTα在復(fù)發(fā)的膀胱癌和未復(fù)發(fā)的膀胱癌兩者間差異有意義(p<0.05)。Tβ4、Tβ10、Tβ15和ProTα的蛋白表達(dá)，在膀胱移行細(xì)胞癌組織年齡、性別和腫瘤數(shù)目上均差異無意義(p>0.05)。 3.膀胱癌組織內(nèi)微血管在同一腫瘤內(nèi)也存在分布與數(shù)量的差異，其中腫瘤邊緣組顯著高于腫瘤中心組和腫瘤淺表組(P<0.05)。76例膀胱癌總的

7、微血管密度顯著高于正常膀胱微血管密度(P<0.05)，且腫瘤邊緣區(qū)微血管密度均值與正常膀胱比較相差非常顯著(P<0.05)。微血管密度與膀胱癌的分期分級和復(fù)發(fā)呈正相關(guān)(p<0.05)。 4.血管內(nèi)皮細(xì)胞Tβ10、Tβ15的蛋白表達(dá)在正常膀胱組織和膀胱癌組織中都呈低表達(dá)或無表達(dá)，提示Tβ10、Tβ15無促進(jìn)膀胱癌邊緣血管生成的作用。血管內(nèi)皮細(xì)胞中Tβ4與ProTα陽性的膀胱癌中，其微血管密度較陰性組顯著增加，尤以癌組織邊緣區(qū)微血管