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文檔簡介
1、目的:
通過觀察檳榔堿對體外培養(yǎng)的人口腔粘膜成纖維細(xì)胞uPARAP表達(dá)的影響,探討檳榔堿在口腔粘膜下纖維性變發(fā)病過程中的作用機制。
方法:
取健康志愿者的口腔正常的粘膜,采用組織塊培養(yǎng)法獲得體外培養(yǎng)的成纖維細(xì)胞,取第3~10代細(xì)胞作為實驗對象。取5個不同濃度組(0μg/ml,5μg/ml,10μg/ml,25μg/ml,50μg/ml)的檳榔堿加入體外培養(yǎng)的正常牙齦成纖維細(xì)胞中,檢測下列指標(biāo):<
2、br> 1.采用四唑鹽比色試驗(MTT)檢測不同濃度檳榔堿不同時間對口腔粘膜成纖維細(xì)胞增殖的影響。
2.采用免疫熒光技術(shù),檢測不同濃度檳榔堿作用口腔粘膜成纖維細(xì)胞后,uPARAP蛋白表達(dá)的改變。
3.采用流式細(xì)胞技術(shù),檢測不同濃度檳榔堿作用口腔粘膜成纖維細(xì)胞后,uPARAP蛋白表達(dá)的改變。
結(jié)果:
1.不同濃度檳榔堿干預(yù)口腔粘膜成纖維細(xì)胞后,結(jié)果顯示:與對照組(即0μg/ml
3、組)相比,5μg/ml組和10μg/ml組的增殖沒有明顯改變;而25μg/ml組和50μg/ml組則比對照組的增殖減慢,50μg/ml組增殖明顯減慢。
2.不同濃度的檳榔堿干預(yù)24小時后,濃度為5μg/ml,10μg/ml的檳榔堿輕微地抑制了成纖維細(xì)胞的uPARAP的表達(dá),但是濃度為25μg/ml,50μg/ml的檳榔堿則明顯地抑制uPARAP的表達(dá)。
結(jié)論:
1.檳榔堿濃度大于25μg/ml時
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