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1、目的:研究堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)在口腔粘膜下纖維性變(oral submucous fibrosis,OSF)和口腔白斑(oral leukoplakia,OLK)組織中的表達(dá)差異,探討OSF的癌變潛能大小和bFGF在其發(fā)病過(guò)程中的作用。 材料與方法: 1.取10例正常人頰部粘膜(normal buccal mueose,NBM)、15例OSF(早
2、、中、晚期各5例)和15例OLK(輕、中、重度異常增生各5例)患者的新鮮病變組織。將其分為2份,一份常規(guī)石蠟包埋,用于H&E染色和免疫組織化學(xué)(immunohistoehemistry,IHC)分析;一份于2min內(nèi)置于液氮中轉(zhuǎn)送至-86℃冰箱保存。 2.對(duì)3組標(biāo)本進(jìn)行bFGF的IHC研究,判斷其表達(dá)差異。 3.用Western Blotting方法對(duì)bFGF在3組組織中的表達(dá)進(jìn)行驗(yàn)證。 結(jié)果: 1.在N
3、BM中,bFGF為陰性或弱陽(yáng)性表達(dá),主要分布在基底膜附近和少量基底細(xì)胞胞漿中,為極少量淺黃色染色。在OSF組織中,bFGF的表達(dá)量升高,早期主要分布在基底膜、基底細(xì)胞胞漿、底層的棘細(xì)胞胞漿和細(xì)胞間隙中,而細(xì)胞核則鮮見(jiàn)表達(dá)。在中期OSF組織中,基底膜、基底細(xì)胞和部分淺、深層棘細(xì)胞胞漿及細(xì)胞間隙中出現(xiàn)成片陽(yáng)性表達(dá),而且少部分細(xì)胞胞核出現(xiàn)黃色染色顆粒。在晚期OSF組織中,bFGF的表達(dá)量更為明顯,大部分棘細(xì)胞胞漿和胞核中出現(xiàn)褐色染色。在輕度異
4、常增生OLK組織的基底膜、散在的棘細(xì)胞胞漿、細(xì)胞間隙中和大部分胞核均有陽(yáng)性表達(dá)。中度異常增生OLK.組織中陽(yáng)性表達(dá)增強(qiáng),主要集中在基底細(xì)胞層和淺層棘細(xì)胞的胞漿、胞核及細(xì)胞間隙。在重度異常增生OLK組織中,bFGF表達(dá)甚為明顯,甚至上皮全層出現(xiàn)強(qiáng)陽(yáng)性表達(dá),細(xì)胞胞核有深棕色染色顆粒沉積。 2.OSF和OLK中bFGF陽(yáng)性細(xì)胞表達(dá)率和灰度值均分別高于和低于NBM組織(P<0.05)。OSF中bFGF陽(yáng)性細(xì)胞表達(dá)率低于OLK,灰度值較后
5、者大,差異有顯著性(P<0.05)。隨OSF的病變程度加重,bFGF的陽(yáng)性細(xì)胞表達(dá)率升高,灰度值則降低(P<0.05)。 3.Westem Blotting結(jié)果證實(shí),bFGF在NBM中弱表達(dá),僅在18KD處有較淡的蛋白條帶;而2種病變組織中,18KD和24KD蛋白條帶隨病理級(jí)別增高而表達(dá)增強(qiáng)。NBM組織中bFGF的蛋白吸光度比值低于OSF和OLK(P<0.05)。OSF中蛋白吸光度比值隨病變程度加重而升高(P<0.05),但是低
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