檳榔堿刺激下口腔粘膜成纖維細(xì)胞以及Hacat細(xì)胞HGF-c-met的表達(dá)研究.pdf

1、目的: 通過觀察不同濃度檳榔堿干預(yù)后體外培養(yǎng)的成纖維細(xì)胞(FB)以及Hacat細(xì)胞中肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子(HGF)及其受體(c-met)的表達(dá)情況，并對(duì)其表達(dá)調(diào)控機(jī)制進(jìn)行初步探討，以了解HGF/c-met在口腔粘膜下纖維性變(OSF)中的發(fā)病作用。 方法: 體外培養(yǎng)口腔粘膜成纖維細(xì)胞、Hacat細(xì)胞，分別經(jīng)0 ug/ml(對(duì)照組)，10ug/ml(G10組)，20ug/ml(G20組)，40ug/ml(G40組)，80

2、 ug/ml(G80組)濃度的檳榔堿刺激后，采用RT-PCR方法檢測(cè)榔堿對(duì)口腔粘膜成纖維細(xì)胞、Hacat細(xì)胞產(chǎn)HGFmRNA、c-metmRNA的影響。 結(jié)果: (1)以未經(jīng)檳榔堿處理的體外培養(yǎng)的正?？谇徽衬は鲁衫w維細(xì)胞為對(duì)照組和10，20，40，80ug/ml檳榔堿處理組比較，各實(shí)驗(yàn)組肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子濃度明顯高于對(duì)照組。40，80ug/ml較10，20ug/ml組表達(dá)增高，10與20，40與80ug/ml之間表達(dá)無差別。

3、 (2)以未經(jīng)檳榔堿處理的體外培養(yǎng)的正常口腔粘膜下成纖維細(xì)胞為對(duì)照組，各實(shí)驗(yàn)組肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體均呈強(qiáng)陽性表達(dá)，各組間表達(dá)無差別。 (3)以未經(jīng)檳榔堿處理的體外培養(yǎng)的Hacat細(xì)胞為對(duì)照組和10，20，40，80ug/ml檳榔堿處理組比較，各實(shí)驗(yàn)組肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體濃度明顯高于對(duì)照組，10，20，40，80 ug/ml檳榔堿Hacat細(xì)胞分泌的肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體水平呈逐漸增高趨勢(shì)，但差別無明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 (4)

4、以未經(jīng)檳榔堿處理的體外培養(yǎng)的Hacat細(xì)胞為對(duì)照組和10，20，40，80ug/ml檳榔堿處理組比較，各實(shí)驗(yàn)組均肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子表達(dá)呈陰性。 (5)FB表達(dá)HGF與Hacat表達(dá)c-met存在正相關(guān)，相關(guān)系數(shù)為0.965。 結(jié)論: 1.檳榔堿促進(jìn)體外培養(yǎng)的口腔成纖維細(xì)胞分泌HGF提示FB對(duì)檳榔堿的刺激表現(xiàn)一種對(duì)抗細(xì)胞毒性反應(yīng)，HGF/c-met系統(tǒng)參與了細(xì)胞的抗損傷修復(fù)機(jī)制。 2.檳榔堿可以誘導(dǎo)體外培養(yǎng)的H