柚皮素、高良姜揮發(fā)油對(duì)肺癌A549細(xì)胞生長(zhǎng)影響的探討.pdf

1、[目的]
　　 柚皮素(Naringenin)是一種黃酮類(lèi)化合物，具有多種生物學(xué)活性和藥理作用。本實(shí)驗(yàn)探討了柚皮素和順鉑(DDP)對(duì)人肺癌細(xì)胞A549的增殖、凋亡及細(xì)胞周期的影響，為肺癌的治療提供一些實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　 高良姜(Alpinia officinarum Hance)是著名的十大南藥之一，在醫(yī)藥、食品和化妝品加工以及蔬果保鮮上有重要的作用。主要化學(xué)成分包括揮發(fā)油、二芳基庚烷類(lèi)、淄醇類(lèi)和黃酮類(lèi)化合物，具有很強(qiáng)的藥

2、理作用。高良姜揮發(fā)油主要成分為1，8-桉葉素、2，2-二甲基環(huán)氧乙烷、葵烷、α-萜品醇、莰烯、樟腦、β-蒎烯、檸檬烯等。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)對(duì)高良姜揮發(fā)油對(duì)人肺癌細(xì)胞A549的增殖、凋亡及細(xì)胞周期影響的研究，探討其分子作用機(jī)制，旨在拓展新的植物化學(xué)藥物治療方法，為肺癌的多模式治療提供實(shí)驗(yàn)資料。
　　 [方法]
　　 通過(guò)體外培養(yǎng)人肺癌A549細(xì)胞，利用MTT法分別檢測(cè)柚皮素、柚皮素和順鉑(DDP)聯(lián)合用藥、高良姜揮發(fā)油對(duì)A549細(xì)

3、胞增殖的影響，Hoechst33258/PI染色檢測(cè)A549細(xì)胞形態(tài)學(xué)變化以及流式細(xì)胞術(shù)(FCM)PI染色法檢測(cè)細(xì)胞周期的改變。Western blot檢測(cè)高良姜揮發(fā)油處理A549細(xì)胞24h后PARP，Bid，Caspase-3及Caspase-8蛋白的表達(dá)。用pcDNA，pcDNA-Bcl-2，pcDNA-Bcl-xl質(zhì)粒轉(zhuǎn)染A549細(xì)胞后，高良姜揮發(fā)油處理A549細(xì)胞24h，Western blot檢測(cè)Bcl-2，Bcl-xl，PA

4、RP，Bid，Caspase-3和Caspase-8蛋白的表達(dá)。
　　 [結(jié)果]
　　 (1)順鉑、柚皮素聯(lián)合用藥24h后，順鉑、柚皮素濃度為(16μM，12.5μM～100μM)時(shí)，與(16μM，0μM)組相比，抑制人肺癌A549細(xì)胞增殖。同樣當(dāng)順鉑、柚皮素濃度為(32μM，12.5μM～100μM)時(shí)，與(32μM，0μM)相比，抑制人肺癌A549細(xì)胞增殖。
　　 (2)流式細(xì)胞儀分析顯示：不同濃度的柚皮素處

5、理A549細(xì)胞24h后，與對(duì)照組相比，G1期細(xì)胞減少，S期及G2期細(xì)胞增多，說(shuō)明柚皮素能影響A549細(xì)胞周期，使細(xì)胞停滯于S期及G2期，有利于細(xì)胞DNA的合成但阻止細(xì)胞分裂。
　　 (3)不同濃度高良姜揮發(fā)油分別處理24h后，人肺癌細(xì)胞A549的生長(zhǎng)增值受到明顯的抑制，并呈現(xiàn)濃度依賴(lài)關(guān)系。
　　 (4)不同濃度高良姜揮發(fā)油處理A549細(xì)胞24h后，熒光染色顯示胞核固縮碎裂，呈大小不等的不規(guī)則塊狀、圓形或花瓣?duì)?，出現(xiàn)典型的

6、細(xì)胞凋亡形態(tài)學(xué)變化。
　　 (5)流式細(xì)胞儀分析顯示：不同濃度高良姜揮發(fā)油處理A549細(xì)胞24h后，與對(duì)照組相比，G1期細(xì)胞增加，S期及G2期細(xì)胞減少，說(shuō)明高良姜揮發(fā)油能影響A549細(xì)胞周期，使細(xì)胞停滯于G1期。
　　 (6)不同濃度高良姜揮發(fā)油處理A549細(xì)胞24h，Bid，Caspase-3，Caspase-8及PARP蛋白表達(dá)明顯高于對(duì)照組。
　　 [結(jié)論]
　　 柚皮素有增強(qiáng)順鉑對(duì)人肺癌A549細(xì)