運動訓(xùn)練對大鼠運動區(qū)域皮質(zhì)梗死灶周Nogo-A的表達(dá)、血清TNF-α水平的影響.pdf

1、目的:腦梗死(Cerebral infarction)嚴(yán)重危害人類健康，具有發(fā)病率高、病死率高、致殘率高和復(fù)發(fā)率高的特點，占腦卒中70％以上。腦梗死的治療可以分為手術(shù)治療和非手術(shù)治療，其中運動訓(xùn)練是臨床上常用的改善肢體功能的一種非手術(shù)療法。近年來許多研究表明，運動訓(xùn)練對于大腦缺血性損傷療效確切，并得到國內(nèi)外學(xué)者的認(rèn)同。為深入探討運動訓(xùn)練在腦梗死恢復(fù)中的作用機(jī)制，本實驗應(yīng)用改良的線栓法建立腦梗死大鼠模型，予以運動訓(xùn)練治療，并對各組大鼠進(jìn)行

2、行為學(xué)改良神經(jīng)功能缺失評分(modified neurological severity scores，mNSS)，通過肉眼和HE染色觀察大鼠運動區(qū)域皮質(zhì)的形態(tài)變化和病理學(xué)改變，免疫組化法(IHC)比較大鼠運動區(qū)域皮質(zhì)梗死灶周髓鞘相關(guān)蛋白-A(nerve myelin-associatedinhibitory factor protein-A，Nogo-A)表達(dá)的變化，以及酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)方法比較血清腫瘤壞死因子-α(tu

3、mor necrosis factor-α，TNF-α)水平的變化。擬初步探討運動訓(xùn)練治療腦梗死大鼠的作用機(jī)制。
　　方法:1、大鼠的選擇及干預(yù)方法:選取健康SD雄性大鼠84只（250g-300g），采用隨機(jī)數(shù)字表法隨機(jī)抽取28只作為正常組，余56只隨機(jī)平均分為模型組和運動訓(xùn)練組。除正常組外均采用改良Longa的方法制作大腦中動脈阻塞（middle cerebral artery occlasion，MCAO）模型，造模后按照Lo

4、nga評分方法進(jìn)行行為學(xué)評分，1-3分的大鼠為成功模型，可進(jìn)行試驗。運動訓(xùn)練組予以運動訓(xùn)練治療。2、指標(biāo)觀察:①各組均在第1d、7d、14d、28d進(jìn)行mNSS評分，然后每組取7只予以采取血清和腦組織標(biāo)本;②采用ELISA法檢測血清中TNF-α的表達(dá)，HE染色觀察大鼠腦組織病理學(xué)變化，采用免疫組化檢測腦組織運動區(qū)域皮質(zhì)梗死灶周Nogo-A的表達(dá);3、統(tǒng)計學(xué)處理:統(tǒng)計學(xué)分析采用IBM SPSS Statistics19.0軟件進(jìn)行，所得均

5、為計量數(shù)值采用(x)±s表示，用單因素方差分析進(jìn)行比較，P＜0.05為具有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　結(jié)果:1、mNSS評分:運動訓(xùn)練組與模型組大鼠的mNSS評分在造模1d后均逐漸下降。術(shù)后1d時，兩組的評分差異無顯著意義(P＞0.05);術(shù)后7d、14d、28d3個時間點，運動訓(xùn)練組較對照組大鼠神經(jīng)功能改善明顯(P＜0.05）。2、HE染色:正常組運動區(qū)域皮質(zhì)內(nèi)神經(jīng)元排列整齊，細(xì)胞形態(tài)完整;模型組大鼠運動區(qū)域皮質(zhì)梗死灶周神經(jīng)元數(shù)量減少，排

6、列紊亂，較多細(xì)胞被破壞，細(xì)胞核固縮，胞質(zhì)染色深;運動訓(xùn)練組與模型組比較，前者神經(jīng)元存活數(shù)量較多，大部分神經(jīng)元形態(tài)和結(jié)構(gòu)正常。3、Nogo-A的表達(dá):通過免疫組化檢測，運動訓(xùn)練組和模型組相比，運動訓(xùn)練組術(shù)后7d、14d和28d Nogo-A的表達(dá)較少，差異具有顯著意義(P＜0.05)。4、TNF-α的表達(dá):與正常組比較，模型組和運動訓(xùn)練組術(shù)后1d血清中TNF-α水平升高，具有顯著差異(P＜0.01);術(shù)后7d，模型組和運動組TNF-α水平

7、繼續(xù)升高，但運動組較模型組升高較慢，兩組比較差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05);術(shù)后14d，模型組和運動訓(xùn)練組含量均下降，運動訓(xùn)練組下降得稍多，兩組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05);術(shù)后28d，模型組和運動訓(xùn)練組含量均接近正常。
　　結(jié)論:1、采用改良Longa大腦中動脈線拴法制備實驗?zāi)Ｐ?，能較好的模擬腦梗死的發(fā)病過程，成功制作MCAO動物模型。2、運動訓(xùn)練能有效改善大鼠運動區(qū)域梗死灶周病理學(xué)表現(xiàn)，運動訓(xùn)練可以下調(diào)運動區(qū)域皮質(zhì)