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文檔簡介
1、目的: 通過過氧化氫(H2O2)誘導(dǎo)大鼠腎小管上皮細(xì)胞(NRK52E)建立氧化損傷模型,觀察銀杏葉提取物( EGB761)對大鼠腎小管上皮細(xì)胞(NRK52E)氧化損傷的保護作用,研究EGB761對大鼠腎小管上皮細(xì)胞凋亡的影響,并初步探討其作用機制。
方法: 體外培養(yǎng)的正常大鼠腎小管上皮細(xì)胞(NRK52E)分為空白、過氧化氫誘導(dǎo)組、不同劑量的EGB761保護組,選擇400μmol/l H2O2作用24小時作為損傷模型劑量,并給予
2、不同濃度EGB761保護,檢測SOD數(shù)值,觀察細(xì)胞損傷情況,MTT法觀察細(xì)胞的活性,流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞凋亡率,RT-PCR檢測Survivin,Caspase-3基因mRNA的表達。
結(jié)果: 1、與對照組相比,100-400μmol/l范圍內(nèi)過氧化氫(H2O2)對大鼠腎小管上皮細(xì)胞均有明顯的損傷作用,SOD值明顯降低(P<0.05),均能誘導(dǎo)大鼠腎小管上皮細(xì)胞氧化損傷,MTT發(fā)現(xiàn)細(xì)胞活性降低(P<0.05),流式檢測細(xì)胞凋亡率
3、增加(P<0.05)。RT-PCR觀察Survivin mRNA表達變化不顯著(P>0.05),Caspase-3 mRNA表達上調(diào)(P<0.05)。2、與400μmol/l過氧化氫誘導(dǎo)組相比,SOD值上升(P<0.05),MTT示細(xì)胞活性增加(P<0.05),流式檢測示細(xì)胞凋亡率降低(P<0.05),RT-PCR觀察 SurvivinmRNA表達上調(diào)(P<0.05),Caspase-3 mRNA表達下調(diào)(P<0.05)。
結(jié)
4、論: 1、過氧化氫(H2O2)在100-400μmol/l范圍內(nèi)可誘導(dǎo)大鼠腎小管上皮細(xì)胞(NRK52E)凋亡;2、 EGB761對過氧化氫(H2O2)誘導(dǎo)大鼠腎小管上皮細(xì)胞(NRK52E)凋亡有保護作用;3、EGB761可能是通過以下機制對H2O2誘導(dǎo)的NRK52E細(xì)胞氧化損傷發(fā)揮保護作用;①EGB761可通過提高機體抗自由基的能力對腎缺血再灌注大鼠發(fā)揮保護作用。②EGB761通過上調(diào)NRK52E細(xì)胞Survivin的表達,下調(diào)Case
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