大豆異黃酮及其代謝產(chǎn)物體外抗氧化活性研究.pdf

1、大豆異黃酮主要由黃豆苷原和染料木素組成,是多酚類化合物,在豆科植物如黃豆中含量較高。攝入動(dòng)物體內(nèi)的大豆異黃酮,在胃腸道微生物作用下被降解為二氫黃豆苷原(Dihydrodaidzein,簡稱DHD)、雌馬酚(Equol)、去氧甲基安哥拉紫檀素(O-desmethylangolensin,簡稱O-Dma)和二氫染料木素(Dihydrogenistein,簡稱DHG)等不同代謝產(chǎn)物。大豆異黃酮具有抗氧化、抗癌、降低心血管病發(fā)生率等多種生物學(xué)活

2、性,這些生物學(xué)活性均被認(rèn)為與氧化應(yīng)激有關(guān)。氧化應(yīng)激在慢性炎癥疾病的發(fā)病機(jī)理中有重要作用?；钚匝踹^多如超氧陰離子、過氧化氫,會(huì)對(duì)DNA造成損傷而使細(xì)胞凋亡。因此,精確測定異黃酮及其代謝產(chǎn)物的抗氧化活性可為構(gòu)效關(guān)系研究和藥物研發(fā)提供理論指導(dǎo)。雖然黃豆苷原、染料木素和一些化學(xué)合成的大豆異黃酮代謝產(chǎn)物的抗氧化活性已有報(bào)道,但不同研究者報(bào)道結(jié)果相差較大。
　　 本研究的目的是明確影響羥基自由基、超氧陰離子和二苯代苦味?；杂苫?DPPH)

3、準(zhǔn)確測定的主要因素。在羥基自由基試驗(yàn)中,首次發(fā)現(xiàn)極低濃度(0.4％,v／v)的有機(jī)溶劑具有較強(qiáng)的羥基自由基清除能力,其中甲醇與乙醇的清除能力相似,均高于丙酮,而相同濃度的乙腈則未檢測到清除羥基自由基活性。羥基自由基反應(yīng)體系不穩(wěn)定,加之大豆異黃酮及其代謝產(chǎn)物水溶性差,因此,羥基自由基清除能力不適合作為該類化合物抗氧化活性測定指標(biāo)。首次發(fā)現(xiàn)甲醇、乙醇和丙酮在0.1％(v／v)濃度下仍具有較強(qiáng)的超氧陰離子自由基清除作用,而乙腈在濃度高達(dá)2.0

4、％(v／v)時(shí)仍未檢測到清除作用。超氧陰離子自由基雖反應(yīng)靈敏度高,但因其體系本身過于堿性(pH10.2),不適于酸性化合物自由基清除測定,方法具有一定局限性。DPPH自由基穩(wěn)定,反應(yīng)體系穩(wěn)定,本研究首次將傳統(tǒng)的檢測時(shí)間30min延長至72h,大大提高了檢測靈敏度,可準(zhǔn)確測定大豆異黃酮及其代謝產(chǎn)物的體外清除DPPH能力,為異黃酮及其代謝產(chǎn)物抗氧化活性測定的首選方法。在DPPH清除試驗(yàn)中,全部4種供試濃度中雌馬酚抗氧化活性均最高,染料木素均