IL-12基因修飾樹突狀細(xì)胞治療侵襲性肺曲霉病的實驗研究.pdf

1、近年來侵襲性肺曲霉菌病的發(fā)病率逐年升高,成為免疫抑制病人中真菌感染的主要死因之一,而細(xì)胞免疫在宿主防御曲霉菌感染中發(fā)揮著主要作用.樹突狀細(xì)胞(dendritic cells,DC)是體內(nèi)最強(qiáng)的專職抗原呈遞細(xì)胞,在調(diào)節(jié)T細(xì)胞免疫中起重要作用,已被廣泛用作免疫反應(yīng)的促進(jìn)工具和免疫治療的靶向.一些研究已證實DC在真菌免疫中起重要作用,DC可以吞噬曲霉菌孢子和菌絲,并將抗原遞呈給T細(xì)胞,啟動防御性T細(xì)胞免疫反應(yīng).IL-12可促進(jìn)巨噬細(xì)胞、NK細(xì)

2、胞和T淋巴細(xì)胞增殖,誘生各種細(xì)胞因子,如IFN-γ等,可調(diào)節(jié)Th1/Th2的應(yīng)答,促進(jìn)T輔助細(xì)胞向Th1方向分化,增強(qiáng)NK細(xì)胞的細(xì)胞毒活性,是一種重要的具有抗系統(tǒng)性真菌感染作用的細(xì)胞因子.該課題通過應(yīng)用腺毒介導(dǎo)的IL-12基因轉(zhuǎn)染DC和曲霉菌抗原沖擊的DC于侵襲性肺曲霉菌病小鼠模型,探討了DC在防御曲霉菌感染中的作用,為DC疫苗在曲霉菌感染中的應(yīng)用提供了實驗依據(jù).我們的結(jié)果顯示:1.采用細(xì)胞因子聯(lián)合誘生方法體外培養(yǎng)小鼠骨髓細(xì)胞可以獲得大

3、量樹突狀細(xì)胞,此細(xì)胞具有典型的DC形態(tài)和活性,能夠吞噬并破壞曲霉菌孢子并逐漸成熟.2.構(gòu)建的含mIL-12的重組腺病毒載體(AdmIL-12)可以高效轉(zhuǎn)染DC,顯著增強(qiáng)DC分泌生物活性IL-12的能力,但對DC的成熟狀態(tài)無顯著影響.3.以曲霉菌抗原沖擊DC,可以誘導(dǎo)體內(nèi)的抗原特異性T細(xì)胞免疫,增強(qiáng)宿主抵抗曲霉菌感染的能力,AdmIL-12對DC的轉(zhuǎn)染可以顯著提高DC誘導(dǎo)T細(xì)胞免疫的能力,增加宿主對曲霉菌感染的抵抗力.我們的結(jié)果提示,DC