以活化Qa-1限制性CD8+T細胞介導的調(diào)節(jié)通路為手段建立獲得性特異性持久性移植免疫耐受.pdf

1、臨床移植免疫學領域中一個不可回避的挑戰(zhàn)是，如何在避免長期使用非特異性免疫抑制手段的前提下建立對供體特異性的免疫耐受，以達到對移植器官慢性排斥反應的有效控制。以原創(chuàng)性“外周T細胞調(diào)節(jié)親合力模式”的理論為基礎，我們提出了一個建立供體特異性、持久性免疫耐受的創(chuàng)新途徑：即，從生物學角度把一個同種移植抗原“轉(zhuǎn)換”成自身抗原，從而使受體免疫系統(tǒng)視同種移植物為自身組織/器官而自然對其產(chǎn)生耐受?！坝H合力模式”的核心概念是：免疫系統(tǒng)不是以識別自身或外來抗

2、原結構上的不同，而是依據(jù)對兩者起免疫反應的 T細胞群體親合力組合的不同，來達到外周“分辨自我和非我”的目的。因此，根據(jù)“親合力模式”的原理，如果能夠首先選擇性清除引起急性排斥反應的抗供體同種抗原的T細胞群體的高親合力部分，并隨后在體內(nèi)重新活化Qa-1/HLA-E限制性CD8+T調(diào)節(jié)細胞，就可以有效控制引起慢性排斥的抗供體同種抗原的中等親合力T細胞部分，從而獲得特異性持久性移植耐受。
　　在本研究中，我們在 C57BL/6小鼠與BA

3、LB/c小鼠間建立了成年小鼠皮膚移植耐受(ATT)模型。在此模型中，我們通過 DST（供體淋巴細胞輸注）聯(lián)合MR-1（抗CD40L抗體）的方法清除了C57BL/6小鼠體內(nèi)引起急性排斥反應的、高親合力的、抗供體同種抗原的 T細胞。該模型鼠的移植皮瓣能夠安全渡過急性排斥反應而進入慢性排斥階段，其中位生存時間（MST)從自然排斥的9~11天延長至75天。由于缺失了高親合力部分，DST/MR-1誘導的移植耐受小鼠（DMT mice）體內(nèi)抗供體的

4、T細胞群體的親合力組合只有中、低親合力部分，模擬了天然抗自身抗原的 T細胞群體親合力的組合。隨后，我們用荷 Hsp60sp的自身樹突狀細胞為疫苗（DC/Hsp60sp）免疫DMT小鼠，結果移植皮瓣存活時間明顯延長，其MST達到160天，并且在20只DC/Hsp60sp免疫的小鼠中有3只獲得了永久耐受（移植皮瓣生存時間＞300天）。但荷 Qdm的樹突狀細胞疫苗和荷Hsp60sp的Qa-1 KO的樹突狀細胞疫苗沒有延長DMT小鼠移植皮瓣的存

5、活時間。
　　為直接驗證以上 DC/Hsp60sp疫苗對慢性排斥反應的有效控制是否由 Qa-1限制性CD8+T調(diào)節(jié)細胞所介導，我們把從DC/Hsp60sp疫苗免疫的DMT小鼠分離出的CD8+T細胞過繼轉(zhuǎn)輸給未經(jīng)免疫的DMT小鼠，發(fā)現(xiàn)這些CD8+T細胞能夠有效延長移植皮瓣的存活時間（MST138天），但從DC/Hsp60sp疫苗免疫的Qa-1 KO-DMT小鼠分離出的CD8+T卻無此延長作用（MST74天）。這些結果說明DC/Hsp

6、60sp疫苗在體內(nèi)誘導產(chǎn)生了一群Qa-1限制性的CD8+T調(diào)節(jié)細胞，而這種調(diào)節(jié)細胞能夠有效控制慢性排斥反應。
　　在體外進一步檢測Qa-1限制性CD8+T調(diào)節(jié)細胞的功能實驗中，我們發(fā)現(xiàn)從DC/Hsp60sp疫苗免疫的小鼠中分離的CD8+T細胞在體外能夠選擇性抑制小鼠對自身傳統(tǒng)蛋白質(zhì)抗原MOG35-55的免疫反應，同時也能夠選擇性抑制DMT小鼠中造成慢性排斥的抗供體同種抗原的免疫反應；但并不影響DMT小鼠針對第三方同種抗原的T細胞增