富集結(jié)腸癌腫瘤肝細(xì)胞的球細(xì)胞與上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化之間關(guān)系的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：研宄結(jié)腸癌細(xì)胞系球培養(yǎng)后能否富集腫瘤干細(xì)胞,以及這種球細(xì)胞是否發(fā)生了上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化。
　　方法：采用結(jié)腸癌細(xì)胞系HT29,HCT116,進(jìn)行球細(xì)胞培養(yǎng)。檢測其腫瘤干細(xì)胞表面標(biāo)志的表達(dá)情況。球細(xì)胞與貼壁細(xì)胞對照,分別進(jìn)行Transwell侵襲和迀移實(shí)驗(yàn),軟瓊脂克隆形成實(shí)驗(yàn)。并使用RT-PCR和Western blot對比分析球細(xì)胞和貼壁細(xì)胞EMT相關(guān)基因和蛋白的表達(dá)情況。
　　結(jié)果：結(jié)腸癌細(xì)胞系HT29,HCT116均能形

2、成腫瘤球細(xì)胞。檢測球細(xì)胞中干細(xì)胞標(biāo)志物升高。Tmnswell和軟瓊脂克隆形成實(shí)驗(yàn)中,球細(xì)胞較相應(yīng)的貼壁細(xì)胞迀移、侵襲和克隆形成能力均增強(qiáng),統(tǒng)計(jì)分析有顯著差異(P<0.05)。上皮細(xì)胞基因ZO-I在球細(xì)胞中的表達(dá)較貼壁細(xì)胞減少,同時球細(xì)胞中間質(zhì)細(xì)胞基因vimentin和fibronectin的表達(dá)較貼壁細(xì)胞升高,統(tǒng)計(jì)分析有顯著差異(P<0.05)。
　　結(jié)論：結(jié)腸癌細(xì)胞HT29和HCT116經(jīng)無血清懸浮培養(yǎng)后可形成球細(xì)胞。這種球細(xì)胞