CD151對人結(jié)腸癌腫瘤干細(xì)胞中Wnt相關(guān)靶基因影響的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、河北醫(yī)科大學(xué)學(xué)位論文使用授權(quán)及知識產(chǎn)權(quán)歸屬承諾本學(xué)位論文在導(dǎo)師( 或指導(dǎo)小組) 的指導(dǎo)下，由本人獨(dú)立完成。本學(xué)位論文研究所獲得的研究成果，其知識產(chǎn)權(quán)歸河北醫(yī)科大學(xué)所有。河北醫(yī)科大學(xué)有權(quán)對本學(xué)位論文進(jìn)行交流、公開和使用。凡發(fā)表與學(xué)位論文主要內(nèi)容相關(guān)的論文，第一署名為單位河北醫(yī)科大學(xué)，試驗(yàn)材料、原始數(shù)據(jù)、申報(bào)的專利等知識產(chǎn)權(quán)均歸河北醫(yī)科大學(xué)所有。否則，承擔(dān)相應(yīng)法律責(zé)任。 ’_ 一，，、 o7 、' ' 一：? 。 一研究生簽

2、名：王烈導(dǎo)師簽章：『> 可墳乞級學(xué)藐顢魯蓋毒：’．．．．． 研究生簽名：土I 蚍導(dǎo)師簽章：f 二1 配級學(xué)豌镢導(dǎo)革．章：一- - ’．．．1 ＼『 ’荔陂手多明日! √．，‘：’。’_ ■．。?。河北醫(yī)科大學(xué)研究生學(xué)位論文獨(dú)創(chuàng)性聲明本論文是在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果，除了文中特別加以標(biāo)注和致謝等內(nèi)容外，文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫的研究成果，指導(dǎo)教師對此進(jìn)行了審定。本論文由本人獨(dú)立撰寫，文責(zé)自負(fù)。研究生簽名： 新

3、臻戶％功7y 年’月叼日中文摘要C D l 5 1 對人結(jié)腸癌腫瘤千細(xì)胞中W n t 相關(guān)靶基因影響的實(shí)驗(yàn)研究摘 要C D l 5 1 是四跨膜超家族蛋白( T M 4 S F ) 的癌基因，它可以促進(jìn)細(xì)胞的運(yùn)動、腫瘤的侵入和轉(zhuǎn)移。C D l 5 1 基因通過促進(jìn)腫瘤組織血管生長及血運(yùn)重建而發(fā)揮其促進(jìn)腫瘤侵襲及轉(zhuǎn)移的作用。C D l 5 1 敲除以后，導(dǎo)致了整個(gè)血管形態(tài)結(jié)構(gòu)的破壞。W n t 信號通路是腫瘤干細(xì)胞自我更新及致癌等功能中密

4、切相關(guān)的重要信號通路。L R G l 和L G R 5 都是W n t 信號通路的靶基因。L R G l 蛋白能夠促進(jìn)腫瘤血管的生長，其在正常血管生長中較少發(fā)揮作用。L G R 5 通過促進(jìn)血管內(nèi)皮生長因子( V E G F ) 的表達(dá)，從而促進(jìn)血管生長，最終促進(jìn)腫瘤形成與轉(zhuǎn)移。腫瘤細(xì)胞在無血清培養(yǎng)基( S F M ) 中培養(yǎng)可初步富集富含腫瘤干細(xì)胞的腫瘤細(xì)胞球。腫瘤干細(xì)胞理論認(rèn)為通過識別和利用腫瘤干細(xì)胞表面標(biāo)志可以準(zhǔn)確地篩選與分離腫瘤

5、干細(xì)胞，C D l 3 3 、C D 4 4 是目前被多數(shù)學(xué)者公認(rèn)的結(jié)腸癌腫瘤干細(xì)胞標(biāo)志物。目的：本研究通過W e s t e m b l o t 方法對比研究結(jié)腸癌H T 2 9 細(xì)胞和敲除C D l 5 1 基因( C D l 5 1 - ) 的H T 2 9 細(xì)胞中W n t 通路相關(guān)靶基因L R G l和L G R 5 蛋白的表達(dá)與C D l 5 1 的相關(guān)性，并通過流式細(xì)胞術(shù)高通量分選結(jié)腸癌干細(xì)胞技術(shù)篩選結(jié)腸癌H T 2 9

6、細(xì)胞和C D l 5r H T 2 9 細(xì)胞中高侵襲性C D 4 4 + C D l 3 3 + H T 2 9 和C D l 5 1 _ C D 4 4 + C D l 3 3 + H T 2 9 細(xì)胞亞群，檢測其成瘤組織中L R G l 和L G R 5 蛋白的表達(dá)差異及與C D l 5 1 的相關(guān)性，旨在探討C D l 5 1 的表達(dá)對結(jié)腸癌侵襲與轉(zhuǎn)移的作用。方法：1 通過W e s t e r nb l o t 方法分別檢測C

7、D l 5 1 + H T 2 9 細(xì)胞及C D l 5 1 一H T 2 9 細(xì)胞的C D l 5 、L G R 5 、L R G l 蛋白的表達(dá)情況，以探究結(jié)腸癌細(xì)胞中C D l 5 1 基因與L G R 5 、L R G l 的關(guān)系。2 通過流式細(xì)胞儀分別篩選無血清培養(yǎng)基( S F M ) 組C D l 5 1 + H T 2 9細(xì)胞、C D l 5 1 一H T 2 9 細(xì)胞和有血清培養(yǎng)基( S S M ) 組C D l 5 l