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1、目的:通過(guò)觀察不同劑量鹽酸戊乙奎醚給予老年大鼠腹腔注射后的不同時(shí)間點(diǎn),大鼠認(rèn)知功能以及與認(rèn)知相關(guān)的海馬乙酰膽堿(Ach)水平、乙酰膽堿酯酶(AchE)活性、海馬星形膠質(zhì)細(xì)胞細(xì)胞數(shù)水平、海馬 s-100β蛋白含量的影響,研究鹽酸戊乙奎醚引起術(shù)后認(rèn)知功能障礙(POCD)的可能機(jī)制。為術(shù)前給予鹽酸戊乙奎醚適宜劑量提供理論基礎(chǔ)和臨床實(shí)踐依據(jù)。方法:將自然老齡大鼠160只隨機(jī)分為空白對(duì)照組(k)及鹽酸戊乙奎醚給藥的低劑量(LP)、中劑量(MP)、
2、高劑量(HP)組,每組40只。每組再隨機(jī)分成5個(gè)亞組(n=8)6h、12h、24h、48h、72h。 LP、 MP、 HP三個(gè)給藥組各大鼠按體重0.32/ kg、0.64/ kg、1.28/ kg分別腹腔注射鹽酸戊乙奎醚,藥液容積按0.1 ml/10 g, K組給予相同容積的生理鹽水。給藥后分別在各亞組即6 h、12 h、24 h、48 h、72 h五個(gè)時(shí)間點(diǎn),用Morris水迷宮測(cè)試學(xué)習(xí)記憶能力,采用比色法測(cè)定大鼠海馬內(nèi)乙酰膽堿(Ac
3、h)水平及乙酰膽堿酯酶(TChE)活性變化;采用ELISA這種酶的測(cè)法檢測(cè)海馬中s-100β蛋白水平;應(yīng)用免疫組織化學(xué)法觀察海馬GFAP免疫陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)的變化。結(jié)果:1.Morris水迷宮結(jié)果:給藥前各組5d的逃避潛伏期逐漸縮短,差異無(wú)顯著性(P>0.05);穿越平臺(tái)次數(shù)各組之間差異無(wú)顯著性(P>0.05);6、12小時(shí),與 k組比較給藥組逃避潛伏期延長(zhǎng)、穿越平臺(tái)次數(shù)減少,差異有顯著性(P<0.05);與 LP比較 MP、HP組差異有顯著
4、性(P<0.05);24、48、72小時(shí),與 K組比較 LP組無(wú)差異(P>0.05),與 K、 LP組比較 MP、 HP組有差異(P<0.05),與 MP組比較, HP組差異無(wú)顯著性(P>0.05);與6、12小時(shí)比較,24、48、72小時(shí) LP組逃避潛伏期縮短、穿越平臺(tái)次數(shù)增加,差異有顯著性(P<0.05), MP、 HP組差異無(wú)顯著性(P>0.05)。2.膽堿酯酶(TChE)活性、乙酰膽堿(Ach)水平:6、12小時(shí),與K組比較給藥
5、組TchE活性升高、Ach水平降低差異有顯著性(P<0.05);24、48、72小時(shí),與 K組比較 LP組 TchE活性降低、 Ach水平升高無(wú)差異(P>0.05),與 K、 LP組比較 MP、 HP組差異有顯著性(P<0.05),與 MP組比較 HP組差異有顯著性(P<0.05);與6、12小時(shí)比較,給藥后24、48、72小時(shí), LP組 TchE活性降低、 Ach水平升高,差異有顯著性(P<0.05), MP、 HP組組內(nèi)差異有顯著性
6、(P<0.05)。3.膠質(zhì)原酸性蛋白(GFAP)在海馬中的表達(dá)程度:6、12小時(shí),各組間比較無(wú)差異(P>0.05)細(xì)胞數(shù)增多;24、48、72小時(shí),與 K組比較 LP組差異無(wú)顯著性(P>0.05),與 K、LP組比較 MP、 HP組 GFAP陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)增多,差異有顯著性(P<0.05),與 MP組比較 HP組差異有顯著性(P<0.05);K、LP組在各個(gè)時(shí)間點(diǎn)相比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);與6、12小時(shí)比較,48、72小時(shí)MP、
7、HP組GFAP陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)增多,差異有顯著性(P<0.05)。與24h比較,48、72小時(shí)MP組GFAP陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)明顯增多,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05)。4.s-100β蛋白含量:6、12小時(shí),各組間無(wú)差異(P>0.05),給藥后24、48、72小時(shí),與 K組比較 LP組差異無(wú)顯著性(P>0.05),與 K、LP組比較 MP組、 HP組蛋白水平升高,差異有顯著性(P<0.05),與 MP組比較 HP組蛋白水平升高,差異有顯著性(P<0
8、.05); K組、 LP組 s-100β蛋白水平在各時(shí)間點(diǎn)相比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),與6、12小時(shí)比較,48、72小時(shí) MP組、 HP組蛋白水平升高,差異有顯著性(P<0.05);與24h比較,48、72小時(shí)MP組蛋白水平明顯升高,差異有顯著性(P<0.05)。結(jié)論:1.利用自然老齡大鼠為實(shí)驗(yàn)對(duì)象,無(wú)手術(shù)麻醉及其他藥物的影響,給予鹽酸戊乙奎醚后,老年大鼠出現(xiàn)記憶功能障礙,并呈現(xiàn)劑量依賴性。2.隨著給藥時(shí)間的推移,適宜的給藥
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