慢性間歇性低壓低氧對大鼠免疫功能的影響.pdf

1、目的：低氧對機體組織具有損傷作用。已有研究表明，低氧通過增強中性粒細胞、巨噬細胞與血管內(nèi)皮細胞的黏附，激活炎癥細胞產(chǎn)生促炎因子，導致包括肺在內(nèi)的多器官炎癥。高原低氧可作為環(huán)境應激原，通過自主神經(jīng)系統(tǒng)和內(nèi)分泌系統(tǒng)的活動改變而影響機體免疫系統(tǒng)功能。慢性間歇性低壓低氧(Chronic intermitttent hypobaric hypoxia，CIHH)可提高機體對缺血/再灌注或缺氧/復氧損傷的耐受性，對心臟、神經(jīng)、肝臟等器官具有明顯的保

2、護作用，但CIHH對機體免疫功能的影響尚無定論。本研究應用流式細胞、免疫組化和電鏡等技術(shù)探討CIHH對細胞免疫和體液免疫的影響。 方法：雄性成年Sprague-Dawley大鼠48只(初始體重200-260g，最后體重290-330g)隨機分為4組：CIHH14天組(CIHH14)、CIHH28天組(CIHH28)、CIHH42天組(CIHH42)、對照組(CON)。CIHH組動物置于低壓氧艙內(nèi)，分別接受14，28，42天的相當

3、于3000米海拔的低壓氧處理，每天5個小時。對照組動物，除不接受慢性間歇性低氧處理外，其它條件與低氧動物相同。每周定時觀察動物的一般活動，測定體重。實驗中，各組動物分別給以常氧(正?？諝?和急性低氧(10％02+90％N2，1小時)處理。動物麻醉，頸部正中切口，頸總動脈插管采集動脈血液。將1ml血液加入EDTA-K2抗凝真空管中，與抗凝劑充分混勻，抗凝劑與血液比值為1:9。再取3ml，全血離心5分鐘(3000g/min)，得到血清。利用

4、流式細胞分析技術(shù)檢測動物血液CD3、CD4、CD8淋巴細胞亞群、NK細胞數(shù)量，采用ELISA方法檢測血清中IgG、糖皮質(zhì)激素(COR)、腎上腺素(EPI)和C-反應蛋白(CRP)含量。按照試劑盒標準進行操作終止反應后15分鐘，在酶標儀上450nm處讀取光密度值，根據(jù)雙對數(shù)曲線得出濃度值。在動物采血后，取胸腺、脾臟組織，測量胸腺、脾臟重量，計算胸腺、脾臟指數(shù)并觀察其超微結(jié)構(gòu)變化。結(jié)果：1.CIHH大鼠于間歇性低壓低氧暴露第一周內(nèi)表現(xiàn)為活動

5、減少，體重增長小于對照組大鼠，但無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。從第二周開始，動物活動增多，體重增長與對照組動物相平行。三周后CIHH大鼠的一般狀況與對照組動物無差別(圖1)。2.與大鼠比較，CIHH14大鼠胸腺指數(shù)和脾臟指數(shù)明顯增加(P<0.05)；CIHH28和CIHH42大鼠胸腺指數(shù)明顯增加(P<0.05)；CIHH28和CIHH42大鼠脾臟重量和指數(shù)無明顯差異(P>0.05)。3.與對照動物相比較，電鏡結(jié)果顯示，CIHH14大鼠胸

6、腺和脾臟淋巴細胞線粒體輕度腫脹，線粒體嵴少部分缺損，而CIHH28大鼠胸腺和脾臟淋巴細胞超微結(jié)構(gòu)無明顯變化。急性低氧導致對照大鼠胸腺和脾臟淋巴細胞嚴重受損，包括線粒體腫脹，大部分嵴與嵴融合或消失。CIHH14大鼠胸腺和脾臟淋巴細胞較急性低氧前明顯受損，甚至較對照大鼠稍重，而CIHH28大鼠胸腺和脾臟淋巴細胞與急性低氧比較無明顯異常，線粒體變化明顯較對照和CIHH14大鼠輕。4.與CON、CIHH28和CIHH42比較，CIHH14大鼠C

7、D8淋巴細胞明顯降低，CD4/CD8比值明顯升高，NK細胞明顯下降(P<0.05)；急性低氧導致CON大鼠CD4淋巴細胞升高，CD8淋巴細胞降低，CD4/CD8比值明顯升高(P<0.05)，NK細胞增加，而對CIHH28和CIHH42大鼠CD4、CD8淋巴細胞和NK細胞無明顯影響(P>0.05)。5.慢性間歇性低壓低氧與急性低氧對大鼠血液IgG無明顯影響(P>0.05)。6.CIHH14大鼠COR較CON、CIHH28和CIHH42大鼠