FOXP3和BTLA基因在食管鱗癌中的表達(dá)及臨床意義.pdf

1、目的：食管癌是常見的消化道惡性腫瘤,我國是高發(fā)區(qū),絕大多數(shù)是鱗癌。它的發(fā)生、發(fā)展、浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移與多種因素有關(guān),是一個(gè)多基因、多步驟共同作用的過程,但是具體的機(jī)制尚不明了。近些年來學(xué)者們注意到腫瘤免疫在其中發(fā)揮的重要作用,給食管癌的診斷和治療帶來了新的方向。2001年發(fā)現(xiàn)的FOXP3基因和2003年發(fā)現(xiàn)的BTLA基因在腫瘤免疫中的作用越來越受到大家的關(guān)注。他們通過不同的機(jī)制但又相互聯(lián)系著發(fā)揮免疫抑制作用。本課題的目的在于建立檢測(cè)人FOXP3

2、和BTLA mRNA含量的實(shí)時(shí)熒光定量RT-PCR的方法,并用來測(cè)定食管鱗癌患者組織中FOXP3和BTLA的基因表達(dá)水平,探討FOXP3和BTLA基因表達(dá)水平與食管鱗癌發(fā)生發(fā)展的關(guān)系,以期給食管鱗癌的腫瘤免疫治療提供一個(gè)新的方向。 方法：收集臨床手術(shù)切除的42例食管鱗癌標(biāo)本和30例對(duì)照標(biāo)本組織?；赥aqMan熒光探針技術(shù),構(gòu)建克隆載體pMD 18-T-FOXP3和pMD 18-T-BTLA作為定量模板,建立實(shí)時(shí)熒光定量RT-P

3、CR方法。在GeneAmp 7000型檢測(cè)儀上測(cè)定42例食管鱗癌標(biāo)本和30例對(duì)照標(biāo)本組織中FOXP3和BTLA mRNA的含量。并且分析FOXP3和BTLA的表達(dá)與42例食管鱗癌患者臨床、病理資料之間的關(guān)系。采用SPSS11.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,計(jì)量資料用-x±s表示,兩組之間比較采用t檢驗(yàn),FOXP3基因與BTLA基因在食管鱗癌中表達(dá)的相關(guān)性用直線相關(guān)統(tǒng)計(jì)分析,結(jié)果均以P<0.05為有差異,具有顯著意義。 結(jié)果：FOXP3

4、 mRNA在42例食管鱗癌標(biāo)本的表達(dá)范圍為3.4×10 4～5.3×10 6拷貝/μg RNA;30例對(duì)照標(biāo)本的表達(dá)范圍為5.6×10 2～1.2×10 4拷貝/μg RNA,食管鱗癌組FOXP3 mRNA的平均拷貝數(shù)顯著高于對(duì)照組[(7.2±2.6)×10 5vs(6.8±3.4)×103]；BTLA mRNA在42例食管鱗癌標(biāo)本的表達(dá)范圍為5.8×10 3～2.7×10 5拷貝/μg RNA；30例對(duì)照標(biāo)本的表達(dá)范圍為2.5×10

5、2～6.1×10 4拷貝/μgRNA,食管鱗癌組BTLA mRNA的平均拷貝數(shù)顯著高于對(duì)照組[(8.8±2.6)×104vs(9.2±3.4)×103]；FOXP3和BTLA mRNA在食管鱗癌組織中的表達(dá)與患者的年齡、性別、腫瘤大小以及分化程度無關(guān),但是與患者的TNM分期、區(qū)域淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有顯著的相關(guān)性。 結(jié)論： 1、成功建立了檢測(cè)人FOXP3和BTLAmRNA含量的實(shí)時(shí)熒光定量RT-PCR的方法； 2、食管鱗癌

6、組FOXP3 mRNA的表達(dá)量高于對(duì)照組； 3、FOXP3 mRNA表達(dá)量與患者的年齡、性別、腫瘤大小和分化程度無關(guān),但與TNM分期、區(qū)域淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有顯著的相關(guān)性,有區(qū)域淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移或IIB～Ⅲ期的患者中FOXP3 mRNA表達(dá)量高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及I～I(xiàn)IA期； 4、食管鱗癌組BTLA mRNA的表達(dá)量高于對(duì)照組； 5、BTLA mRNA表達(dá)量與患者的年齡、性別、腫瘤大小和分化程度無關(guān),但與TNM分期、區(qū)域淋巴結(jié)轉(zhuǎn)