EGFR及β-catenin在食管鱗癌組織中的表達及臨床意義.pdf

1、背景和目的：食管癌是一種嚴重威脅人類生命健康的消化道惡性腫瘤，以鱗狀上皮癌多見，中國是世界上食管癌的高發(fā)國家，也是世界上食管癌高死亡率的國家之一，在我國占消化道腫瘤死亡的第二位，僅次于胃癌，而中國北方地區(qū)特別是河南省林州市是中國乃至世界上食管癌發(fā)病率最高的地區(qū)之一。食管癌的發(fā)生是一個多因素，多步驟的發(fā)生過程，預(yù)后之差在于其癌細胞有較強的增殖能力及侵襲性，即使一些表面生長緩慢的食管癌也常常伴有深層浸潤。隨著分子生物學(xué)的發(fā)展，利用分子生物學(xué)

2、的指標判斷預(yù)后、指導(dǎo)綜合治療以及發(fā)展分子生物治療已成為提高惡性腫瘤治療效果的發(fā)展方向。EGFR(epidermal growth factorreceptor，EGFR)屬于Ⅰ型跨膜酪氨酸激酶生長因子受體，與配體結(jié)合后，可啟動其信號屬于Ⅰ型跨膜酪氨酸激酶生長因子受體，與配體結(jié)合后，可啟動其信號轉(zhuǎn)導(dǎo)下游一系列的級聯(lián)反應(yīng)，最終引起核內(nèi)早期反應(yīng)基因轉(zhuǎn)錄水平的增加，使細胞增殖、轉(zhuǎn)化。現(xiàn)有的研究表明EGFR在腫瘤細胞的增殖、分化、抗凋亡、腫瘤血管

3、形成及轉(zhuǎn)移等方面起重要作用。β-連環(huán)蛋白(β-catenin，β-cat)是多功能蛋白質(zhì)，既參與E-cad/cat復(fù)合體的形成，在細胞粘附中發(fā)揮作用，又作為Wnt信號傳導(dǎo)通路的中心環(huán)節(jié)參與細胞增殖分化的調(diào)控。研究表明EGFR激活后可調(diào)控E-cad/cat復(fù)合體中的β-catenirl磷酸化導(dǎo)致其從復(fù)合體分離，從而促進腫瘤的轉(zhuǎn)移。本實驗探討EGFR和β-catenin在食管鱗癌及癌旁正常組織中的表達及其與臨床病理參數(shù)的關(guān)系，為評估預(yù)后、指

4、導(dǎo)治療提供依據(jù)。 材料與方法：1．60例系焦作市第二人民醫(yī)院外科1992年1月至2000年8月手術(shù)切除食管癌標本(同一病例包括癌組織、5cm以外的癌旁正常組織)，HE切片病理證實為鱗癌。其中男性33例，女性27例；年齡35～73歲，平均年齡50歲。高、中、低分化分別為34、12和14例，其中31例有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，29例無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移。按TNM分期標準，Ⅰ期17例，Ⅱ期12例，Ⅲ期15例，及Ⅳ期16例；按浸潤深度分，T<,1> 13例

5、，T<,2> 12例，T<,3> 21例， T<,4> 14例。全部病例術(shù)后進行6～18月的隨訪，隨訪結(jié)束時死亡29例，尚生存31例。 2．應(yīng)用S-P免疫組化法，EGFR、β-catenin濃縮型鼠抗人單克隆抗體、免疫組化試劑盒及DAB試劑盒均購自北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司，取厚4μm石蠟切片，常規(guī)脫蠟、水化后，采用電爐加熱煮沸修復(fù)抗原，EGFR、β-catenin單克隆抗體均按1∶100稀釋，以PBS代替一抗作陰性對照，用已證實EG

6、FR、β-catenin染色陽性的食管鱗癌切片作陽性對照。 3．應(yīng)用sPSS10.0統(tǒng)計軟件包進行x<'2>檢驗，Spearman相關(guān)分析，生存分析應(yīng)用Kaplan-Meier，Log-rank test時序檢驗法，檢驗水準為α=0.05。 結(jié)果： 1．EGFR、β-catenin陽性定位分布及表達：(1)EGFR陽性顆粒主要位于腫瘤細胞的胞漿內(nèi)，周圍基質(zhì)中未見陽性染色。癌旁正常組織和癌組織中EGFR陽性表達率分別為18

7、.3％(11/60)和71.7％(43/60)，兩組間相比差異有統(tǒng)計學(xué)意義(x<'2>=34.478，P<0.01)。 (2)β-catenin在癌旁正常組織中表達均位于細胞膜，胞漿未見明顯的陽性信號，而食管鱗癌組織中呈異常表達，胞膜表達減少，出現(xiàn)胞漿或胞核表達，癌旁正常組織和癌組織中β-catenin陽性表達率分別為91.7％(55/60)和65％(39/60)，兩組間相比差異有統(tǒng)計學(xué)意義(x<'2>=12.570，P<0.0

8、1)。 2．EGFR、β-catenin的表達與食管癌臨床病理特征及預(yù)后的聯(lián)系：(1)在食管鱗癌中隨去分化程度的增高、浸潤深度的增加及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，EGFR陽性表達升高，高分化與中、低分化組的陽性率分別為57.7％(15/26)，82.4％(28/34)，浸潤在未及外膜(T1、T2)與侵及外膜或以外區(qū)域(T3、T4)的陽性率分別為48.0％(12/25)，77.1％(27/35)，無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組與有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組陽性率分別為58.6

9、％(17/29)，83.9％(26/31)，差異均有顯著性(P<0.05)。按TNM分期，Ⅲ、Ⅳ期EGFR陽性表達者28例(90.3％)，顯著高于Ⅰ、Ⅱ期(51.7％，15/29)(P<0.05)。比較18月生存率，EGFR表達陽性組生存率為41.9％(18/43)與EGFR表達陰性組76.5％(13/17)相比，差異亦有顯著性(P<0.05)。 (2)60例食管鱗癌中，高分化組β-catenin的陽性表達率(88.5％，23/

10、26)明顯高于中、低分化組(47.8％，16/34)(P<0.05)，無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組陽性表達率82.8％(24/29)亦高于有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組48.4％(15/31)，有顯著性差異(P<0.05)。Ⅰ、Ⅱ期β-catenin陽性表達率為79.3％(23/29)，Ⅲ、Ⅳ期51.6％(16/31)，兩組相比差異有顯著性(P<0.05)，且β-catenin的陽性表達組18月生存率59.0％(23/39)高于β-catenin的陰性表達組38.1

11、％(8/21)，差異亦具有顯著性(P<0.05)。在浸潤深度方面T1、T2與T3、T4陽性表達率分別56％(14/25)，71.4％(25/35)，差異無顯著性(P>0.05)。 3．EGFR和β-catenin在食管癌中表達的相關(guān)性分析：EGFR與β-catenin共同陽性表達者為23例，共同陰性表達者1例，EGFR表達陽性但β-catenin陰性者20例，EGFR表達陰性但β-catenin陽性者16例，EGFR與β-cat

12、enin表達呈負相關(guān)關(guān)系(r=-0.384，P=0.002)。 結(jié)論：1．EGFR在食管鱗癌中呈現(xiàn)過表達，與TNM分期、分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、18個月生存率、浸潤深度相關(guān)，EGFR過表達可能在食管鱗癌的發(fā)展、浸潤、轉(zhuǎn)移中起重要作用，EGFR過表達者預(yù)后差。 2．β-catenin在食管鱗癌中胞膜表達減少，出現(xiàn)胞漿、胞核異常表達，與TNM分期、分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、18個月生存率相關(guān)，和浸潤深度無關(guān)，提示β-catenin