LPS通過抑制PP2Ac的表達(dá)促進(jìn)胰腺癌細(xì)胞的侵襲.pdf

1、目的:
　　炎癥微環(huán)境在胰腺癌的演進(jìn)過程當(dāng)中起著重要作用。有研究發(fā)現(xiàn),炎癥刺激可以抑制腫瘤抑制因子蛋白磷酸酶2A(protein phosphatase2A, PP2A)的表達(dá)。本研究中,采用脂多糖(Lipopolysaccharide, LPS)作為炎癥刺激方式,研究炎癥對胰腺癌細(xì)胞PP2A催化性C亞基(PP2Ac)表達(dá)的影響及對細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移能力的影響。
　　方法:
　　1、收集11例經(jīng)病理確診的胰腺癌標(biāo)本(包括癌組

2、織和癌旁組織),檢測標(biāo)本和7類胰腺癌細(xì)胞系PP2Ac mRNA的表達(dá)水平;
　　2、胰腺癌細(xì)胞SW1990經(jīng)LPS處理后檢測PP2Ac表達(dá)水平及侵襲能力;
　　3、構(gòu)建 PP2Acα表達(dá)質(zhì)粒 pIRES2-EGFP-PP2Acα,通過瞬時轉(zhuǎn)染,構(gòu)建 PP2Ac過表達(dá)胰腺癌細(xì)胞SW1990;
　　4、將胰腺癌細(xì)胞 SW1990分空載體組和 PP2Ac過表達(dá)組,組內(nèi)再分對照組和LPS處理組,分別檢測各組細(xì)胞的侵襲能力,通過

3、比較探討 LPS對細(xì)胞侵襲力的影響是否通PP2Ac依賴性機制。
　　5、PP2Ac mRNA和蛋白表達(dá)水平通過Real time-PCR和Western Blot檢測;胰腺癌細(xì)胞侵襲能力通過Transwell侵襲實驗檢測。
　　結(jié)果:
　　1、胰腺癌組織中PP2Ac mRNA的表達(dá)水平顯著低于癌旁組織(P<0.01),胰腺癌細(xì)胞系中PP2Ac mRNA也呈低水平表達(dá)。
　　2、LPS作用后胰腺癌細(xì)胞SW1990

4、PP2Ac mRNA的表達(dá)水平較對照組下降(P<0.01);且PP2Ac蛋白表達(dá)水平也下降。
　　3、LPS處理后胰腺癌細(xì)胞SW1990穿過聚碳酸酯膜的細(xì)胞數(shù)較對照組增多(P<0.01)。
　　4、PP2Acα表達(dá)質(zhì)粒pIRES2-EGFP-PP2Acα瞬時轉(zhuǎn)染入SW1990細(xì)胞后PP2Ac蛋白表達(dá)水平較對照組和空載體組升高。
　　5、空載體組中LPS處理組中穿過聚碳酸酯膜的細(xì)胞數(shù)較對照組增加(P<0.01);PP2A