COX-2、MMP-14和胰腺癌細胞增殖、侵襲、轉(zhuǎn)移的關(guān)系研究.pdf

1、目的：
　　通過測定不同濃度的環(huán)氧合酶-2抑制劑塞來昔布對胰腺癌細胞增殖、侵襲、遷移能力以及對環(huán)氧合酶-2（cyclooxygenase-2，COX-2）、基質(zhì)金屬蛋白酶14（matrix metalloproteinase14，MMP-14）的蛋白表達影響來探討 COX-2抑制劑塞來昔布對胰腺癌的作用及相關(guān)作用機制。
　　方法：
　　1.體外培養(yǎng)人胰腺癌細胞系 PANC-1細胞；
　　2.分別用0（無）、20（

2、低）、60（中）、100（高）μmol/L四個塞來昔布濃度對 PANC-1細胞進行不同時間（24、48和72h）處理，MTT比色法檢測細胞的增殖能力，Transwell侵襲實驗和劃痕實驗檢測細胞的侵襲能力和遷移能力，酶聯(lián)免疫吸附劑測定（EILISA）法檢測 COX-2和 MMP-14的蛋白表達情況；
　　3.數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析。
　　結(jié)果：
　　1. MTT結(jié)果顯示不同濃度的塞來昔布作用24、48和72h后 PANC-1

3、細胞的增殖能力下降，隨著塞來昔布濃度的增加，抑制作用逐漸增強，且隨著塞來昔布作用時間的延長，抑制作用也逐漸加強，抑制作用呈時間和濃度依賴性(P<0.05)；
　　2. Transwell侵襲實驗結(jié)果顯示不同濃度的塞來昔布作用24h后 PANC-1細胞的侵襲能力下降，穿過基質(zhì)膠的細胞個數(shù)分別為300.654±12.558、271.041±10.569、184.003±10.865和92.667±7.567(F=237.182，P<0

4、.05)，呈濃度依賴性；
　　3.劃痕實驗結(jié)果顯示不同濃度的塞來昔布作用24h后 PANC-1細胞的遷移能力下降，相對遷移距離分別為11.400±0.959、9.511±1.110、5.856±0.778和2.844±0.416(F=59.516，P<0.05)，呈濃度依賴性；
　　4.正常 PANC-1細胞呈梭形或多角形，狀態(tài)良好，細胞形態(tài)學(xué)提示不同濃度的塞來昔布作用24h后 PANC-1細胞逐漸變圓、皺縮并開始出現(xiàn)死細胞

5、；
　　5. ELISA結(jié)果提示不同濃度的塞來昔布作用24h后胰腺癌細胞中 COX-2和 MMP-14的蛋白表達水平相應(yīng)降低，均呈濃度依賴性，COX-2蛋白表達水平分別為0.876±0.023、0.682±0.027、0.505±0.022和0.384±0.019(F=262.537，P<0.05)；MMP-14蛋白表達水平分別為7.955±0.297、7.031±0.178、6.072±0.209、和5.047±0.216(F=

6、89.247，P<0.05)；
　　6. PANC-1細胞內(nèi) COX-2和 MMP-14的蛋白表達具有顯著正相關(guān)性(r=0.873，P<0.05)。
　　結(jié)論：
　　1. COX-2抑制劑塞來昔布以濃度梯度、時間梯度的形式減弱人胰腺癌細胞系 PANC-1的增殖能力，以濃度梯度的形式減弱人胰腺癌細胞系 PANC-1的侵襲及遷移能力；
　　2. COX-2抑制劑塞來昔布抑制 COX-2表達后，可能通過下調(diào) MMP-1