腦膠質瘤MGMT基因啟動子甲基化及蛋白表達研究.pdf

1、目的：MGMT基因啟動子區(qū)的過甲基化可導致MGMT基因的轉錄失活，本研究擬初步探討腦膠質瘤中MGMT基因啟動子甲基化及其蛋白表達與腫瘤發(fā)生和進展的關系。并探討MGMT基因甲基化作為膠質瘤個體化治療靶點的依據(jù)。
　　 方法：膠質瘤SHG-44細胞株及其干細胞培養(yǎng)、鑒定。逆轉錄聚合酶鏈反應(Reversetranscriptase polymerase chain reactioN,RT-PCR)方法檢測SHG-44細胞株及腦腫瘤干

2、細胞中MGMT基因mRNA表達情況。甲基化特異性PCR (methylation-specific PCR，MSP)方法檢測49例腦膠質瘤標本及膠質瘤細胞MGMT基因啟動子甲基化情況。免疫組織化學(Envision兩步法)方法檢測腦膠質瘤MGMT蛋白表達及P53蛋白表達。
　　 結果：膠質瘤SHG-44細胞株及其干細胞培養(yǎng)、鑒定成功，腦腫瘤干細胞(brain tumorstem cell，BTSC)CD133陽性。SHG-44細

3、胞株存在MGMT基因啟動子過甲基化，mRNA表達缺失，而BTSC MGMT基因啟動子未見甲基化，其mRNA表達陽性。49例腦膠質瘤患者中，MGMT基因啟動子甲基化陽性者26例占53.06％(26/49)。腦膠質瘤病理分級Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ級MGMT基因啟動子區(qū)甲基化陽性率分別為45.45％、50.0％、72.72％，各組問無顯著性差異（p=0.32）。腦膠質瘤MGMT基因啟動子甲基化陽性率男性55.55％，女性50.0％，兩組問無顯著性差異(P

4、=0.698)。>50年齡組、50腦膠質瘤患者MGMT基因啟動子甲基化陽性率為分別為61.53％、50.0％，兩年齡組間甲基化陽性率無顯著性差異(P=0.475)。49例腦膠質瘤MGMT蛋白表達陽性率為55.10％ (27/49)。腦膠質瘤病理分級Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ級MGMT蛋白表達陽性率分別為59.09％、50.0％、45.45％，各組間差異無統(tǒng)計學意義(P=0.754)，MGMT蛋白表達與性別、年齡組間差異無統(tǒng)計學意義(P=0.517、P=

5、0.915)。49例腦膠質瘤中，27例MGMT表達陽性的組織中8例甲基化陽性；22例MGMT表達陰性的組織中，18例甲基化陽性，腦膠質瘤MGMT基因啟動子甲基化與蛋白表達呈負相關(r=-0.520，p<0.05)。27例MC3MT蛋白表達陽性的組織中7例P53蛋白表達陽性；22例MGMT蛋白表達陰性的組織中，12例P53蛋白表達陽性，膠質瘤組織MGMT與053的表達呈負的相關關系(1=-0.292，P<0.05)。
　　 結論：