干細(xì)胞基因OCT4過(guò)表達(dá)對(duì)胃癌細(xì)胞侵襲遷移的影響研究.pdf

1、目的:構(gòu)建穩(wěn)轉(zhuǎn)過(guò)表達(dá)干細(xì)胞基因OCT4的胃癌細(xì)胞株。研究過(guò)表達(dá)干細(xì)胞基因OCT4對(duì)胃癌細(xì)胞的生物學(xué)特性的改變，并探討改變這些生物學(xué)特性的作用機(jī)制。
　　方法：構(gòu)建攜帶OCT4基因的重組質(zhì)粒，用慢病毒載體感染SGC-7901得到穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞株。Transwell細(xì)胞侵襲和遷移實(shí)驗(yàn)、細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)、細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)，分別檢測(cè)過(guò)表達(dá)OCT4對(duì)胃癌細(xì)胞的侵襲、遷移及增殖能力的影響。.利用熒光定量PCR、細(xì)胞免疫組化、Western–Blot檢測(cè)過(guò)表

2、達(dá)OCT4的胃癌細(xì)胞中Wnt信號(hào)通路基因及胃癌干細(xì)胞標(biāo)志基因表達(dá)情況。裸鼠體內(nèi)成瘤實(shí)驗(yàn)，檢測(cè)過(guò)表達(dá)OCT4的胃癌細(xì)胞的致瘤性。
　　結(jié)果：成功構(gòu)建穩(wěn)轉(zhuǎn)過(guò)表達(dá)OCT4基因的胃癌細(xì)胞株。Transwell細(xì)胞侵襲及遷移實(shí)驗(yàn)檢測(cè)提示：過(guò)表達(dá)OCT4基因的胃癌細(xì)胞的侵襲遷移能力明顯增強(qiáng)，與空白組及陰性對(duì)照組比較，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)提示：過(guò)表達(dá) OCT4基因的胃癌細(xì)胞的遷移能力明顯增強(qiáng)，與空白組及陰性對(duì)照組比較

3、，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。MTs實(shí)驗(yàn)檢測(cè)表明：過(guò)表達(dá)OCT4基因的胃癌細(xì)胞的增殖能力增強(qiáng)，與空白組及陰性對(duì)照組比較，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。熒光定量PCR、細(xì)胞免疫組化、Western–blot實(shí)驗(yàn)結(jié)果示：過(guò)表達(dá)OCT4基因的胃癌細(xì)胞的OCT4、Sox2、β-catenin、Wnt3相對(duì)表達(dá)水平都有不同程度的升高，與空白組及陰性對(duì)照組比較，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。熒光定量PCR檢測(cè)過(guò)表達(dá)基因OCT4的

4、胃癌細(xì)胞C-myc、Klf4、CD44無(wú)明顯變化，與空白組及陰性對(duì)照組比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。裸鼠體外成瘤實(shí)驗(yàn)，提示過(guò)表達(dá)OCT4的胃癌細(xì)胞的致瘤性增強(qiáng)，瘤體大小及瘤體重量明顯增大，與空白組及陰性對(duì)照組比較，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。
　　結(jié)論：胃癌細(xì)胞過(guò)表達(dá)OC T4基因具有促進(jìn)胃癌細(xì)胞的惡性侵襲遷移、增殖能力及致瘤性。表明OCT4基因在胃癌細(xì)胞的惡性侵襲遷移、增殖及致瘤方面發(fā)揮重要的作用。過(guò)表達(dá)OCT