賁門腺癌和遠(yuǎn)端胃腺癌組織p15INK4b、CyclinD1、CDK4表達(dá)的對(duì)比研究.pdf

1、目的：近幾十年來，隨著人們物質(zhì)生活水平的提高和醫(yī)療檢測(cè)手段的進(jìn)步，胃癌的總體發(fā)病率在全世界范圍內(nèi)呈下降趨勢(shì)，但是，發(fā)生部位及組織學(xué)類型卻發(fā)生了明顯變化。主要表現(xiàn)為胃遠(yuǎn)端部位（胃竇）胃癌發(fā)病率下降而食管與胃交界處腺癌發(fā)生率則在上升，食管鱗狀細(xì)胞癌發(fā)生率下降而腺癌的發(fā)生率上升。這種變化已引起國內(nèi)外學(xué)者的廣泛關(guān)注，并開展了針對(duì)這兩者之間比較的大量研究。
　　 食管胃交界腺癌（AEG）是指發(fā)生于食管胃交界(EGJ)區(qū)域的腺癌，從解剖學(xué)角

2、度包括食管遠(yuǎn)端腺癌和胃賁門腺癌。由于EGJ解剖學(xué)部位的特殊性和組織學(xué)的復(fù)雜性，各國學(xué)者對(duì)此部位腫瘤的分類及分型看法不一。目前被大多數(shù)學(xué)者接受并廣泛應(yīng)用的是Siewert分類，其以腫瘤中心與距鱗柱狀上皮交界部（Z線）的距離為分類根據(jù)將AEG分為三型：AEGⅠ型為源于食管特異性腸上皮化生區(qū)域（Barrett食管）的遠(yuǎn)端食管腺癌；AEGⅡ型為真正意義的賁門腺癌，指腫瘤中心距EGJ近心側(cè)1cm和遠(yuǎn)心側(cè)2cm區(qū)域內(nèi)的腺癌；AEGⅢ型為賁門下腺癌。

3、我國將AEGⅡ型和Ⅲ型籠統(tǒng)稱為賁門腺癌(GCA)。近幾年，我國賁門腺癌的發(fā)病率呈現(xiàn)日益增高的趨勢(shì)，這種情況在食管癌及胃癌高發(fā)區(qū)居民中表現(xiàn)尤為明顯，但其具體機(jī)制尚不清楚。有學(xué)者研究發(fā)現(xiàn)賁門腺癌和遠(yuǎn)端胃腺癌在生物學(xué)行為和發(fā)病機(jī)制上存在著一定差異，提示賁門腺癌是一種獨(dú)特的胃癌病理學(xué)亞型。
　　 細(xì)胞周期調(diào)控異常是引起腫瘤發(fā)生的一個(gè)重要機(jī)制。細(xì)胞周期素(Cyclin)、細(xì)胞周期素依賴蛋白激酶(CDK)、CDK抑制因子(CDKI)等在細(xì)胞

4、周期調(diào)控中發(fā)揮著重要作用。p15INK4b是近年來發(fā)現(xiàn)的一類CDKI分子，其編碼的p15蛋白可以與Cyclin D1競爭結(jié)合CDK4/6分子，從而抑制Rb蛋白磷酸化，使細(xì)胞周期阻滯在G1期。同時(shí)，研究發(fā)現(xiàn)在多種腫瘤中存在p15INK4b基因的突變、缺失及甲基化等改變。此外，據(jù)統(tǒng)計(jì)結(jié)果表明，80％的腫瘤細(xì)胞株中p15INK4b基因的表達(dá)存在失活現(xiàn)象。目前已有研究提示，p15INK4b基因與胃癌的發(fā)生發(fā)展及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)。
　　 為

5、探討賁門腺癌的生物學(xué)特性，分析賁門腺癌與遠(yuǎn)端胃腺癌在腫瘤發(fā)病機(jī)制方面可能存在的差異，本研究擬采用免疫組織化學(xué)方法，對(duì)比研究賁門腺癌和遠(yuǎn)端胃腺癌病例中p15INK4b、CyclinD1和CDK4的表達(dá)情況。
　　 方法：選取2010年河北醫(yī)科大學(xué)第四醫(yī)院手術(shù)切除胃癌患者原發(fā)灶標(biāo)本共80例，其中54例為賁門腺癌（腫瘤中心位于Z線上1cm與下2cm區(qū)域內(nèi)的腺癌），26例為遠(yuǎn)端胃腺癌，同時(shí)取胃癌手術(shù)切除標(biāo)本未受累的胃殘端正常胃黏膜54例

6、。采用免疫組化SP法對(duì)比研究p15INK4b、CyclinD1和CDK4在賁門腺癌和遠(yuǎn)端胃腺癌中的表達(dá)，分析其與臨床病理特征的關(guān)系及三者之間的相互作用關(guān)系。統(tǒng)計(jì)分析運(yùn)用SPSS16.0軟件，數(shù)據(jù)采用x2檢驗(yàn)、Fisher確切概率等方法進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。
　　 結(jié)果：
　　 1、p15INK4b蛋白免疫組織化學(xué)染色結(jié)果
　　 1.1賁門腺癌和遠(yuǎn)端胃腺癌組織中p15INK4b蛋白的表達(dá)情況：p15INK4b蛋白陽性反應(yīng)定

7、位于細(xì)胞核和/或細(xì)胞漿，胃正常粘膜中p15 INK4b的陽性表達(dá)率為64.8％，賁門腺癌和遠(yuǎn)端胃腺癌的陽性表達(dá)率分別為31.5％和7.7％，均明顯低于胃正常黏膜。責(zé)門腺癌和遠(yuǎn)端胃腺癌p15INK4b陽性表達(dá)率的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 1.2賁門腺癌和遠(yuǎn)端胃腺癌組織中p15INK4b蛋白表達(dá)的臨床病理意義：賁門腺癌p15 INK4b在高分化組的陽性表達(dá)率52.2％，明顯高于低分化組的表達(dá)率。無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組的陽性表達(dá)率75％，明顯

8、高于有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組。但其表達(dá)與患者年齡、性別及浸潤深度均無關(guān)。
　　 遠(yuǎn)端胃腺癌p15INK4b蛋白在無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組陽性表達(dá)率33.3％，高于有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組。但其表達(dá)與患者年齡、性別、分化程度及浸潤深度無關(guān)。
　　 賁門腺癌和遠(yuǎn)端胃腺癌p15INK4b的臨床病理意義有所差異，賁門腺癌p15INK4b的表達(dá)與分化程度和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移呈明顯相關(guān)關(guān)系，而遠(yuǎn)端胃腺癌p15INK4b的表達(dá)僅與有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)。
　　 2、C

9、yclinD1蛋白免疫組織化學(xué)染色結(jié)果
　　 2.1賁門腺癌和遠(yuǎn)端胃腺癌組織中CyclinD1蛋白的表達(dá)情況：CyclinD1蛋白陽性反應(yīng)定位于細(xì)胞核。54例正常胃粘膜中10例可見CyclinD1陽性表達(dá)(18.5％)，顯著低于胃癌組。CyclinD1蛋白在賁門腺癌中的陽性表達(dá)率為40.1％，與遠(yuǎn)端胃腺癌無明顯差異。
　　 2.2賁門腺癌和遠(yuǎn)端胃腺癌組織中CyclinD1蛋白表達(dá)的臨床病理意義：賁門腺癌病例中高分化組Cy

10、clinD1的陽性表達(dá)率為74.0％，明顯高于低分化組。賁門腺癌組織CyclinD1的表達(dá)與患者年齡、性別、有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及浸潤深度均無關(guān)。遠(yuǎn)端胃腺癌病例中伴淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組CyclinD1的陽性表達(dá)率為60.0％，明顯高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組。遠(yuǎn)端胃腺癌CyclinD1的表達(dá)與患者年齡、性別、分化程度、浸潤深度均無相關(guān)關(guān)系。
　　 研究結(jié)果提示，賁門腺癌和遠(yuǎn)端胃腺癌CyclinD1的臨床病理意義有一定差異，賁門腺癌CyclinD1的表達(dá)

11、與分化程度密切相關(guān)，而遠(yuǎn)端胃腺癌CyclinD1的表達(dá)與淋巴結(jié)有無轉(zhuǎn)移相關(guān)。
　　 3、CDK4蛋白免疫組織化學(xué)染色結(jié)果
　　 3.1賁門腺癌和遠(yuǎn)端胃腺癌CDK4蛋白的表達(dá)情況：CDK4蛋白陽性反應(yīng)定位于細(xì)胞核和/或細(xì)胞漿。賁門腺癌54例中有32例CDK4蛋白陽性表達(dá)，陽性表達(dá)率為59.3％，略低于遠(yuǎn)端胃腺癌。CDK4蛋白在正常胃粘膜中的陽性表達(dá)率顯著低于兩部位腫瘤中的表達(dá)。
　　 3.2賁門腺癌和遠(yuǎn)端胃腺癌CD

12、K4蛋白表達(dá)的臨床病理意義：賁門腺癌病例中高分化組CDK4的陽性表達(dá)率為34.8％，明顯低于低分化組。無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組的表達(dá)率為25.0％，明顯低于有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組。CDK4的表達(dá)與患者年齡、性別、腫瘤大小及浸潤深度均無相關(guān)關(guān)系。遠(yuǎn)端胃腺癌CDK4的表達(dá)與患者年齡、性別、分化程度、浸潤深度及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移均無相關(guān)關(guān)系。賁門腺癌CDK4的表達(dá)與分化程度和淋巴轉(zhuǎn)移呈明顯相關(guān)關(guān)系，而遠(yuǎn)端胃腺癌CDK4的表達(dá)與分化程度和淋巴轉(zhuǎn)移無相關(guān)關(guān)系。
　　

13、 4、賁門腺癌和遠(yuǎn)端胃腺癌組織中p15NK4b、CyclinD1和CDK4蛋白表達(dá)的關(guān)系
　　 p15INK4b和CyclinD1在賁門腺癌和遠(yuǎn)端胃腺癌中均呈負(fù)相關(guān)關(guān)系。同樣，p15INK4b和CDK4在兩腫瘤中成負(fù)相關(guān)關(guān)系，CyclinD1和CDK4在兩者中呈正相關(guān)關(guān)系。
　　 結(jié)論：
　　 1、賁門腺癌和遠(yuǎn)端胃腺癌組織中p15INK4b的表達(dá)明顯低于正常胃粘膜，而CyclinD1和CDK4的表達(dá)均明顯高于正

14、常胃粘膜。
　　 2、p15INK4b在責(zé)門腺癌中的陽性表達(dá)率高于遠(yuǎn)端胃腺癌，CyclinD1和CDK4在賁門腺癌與遠(yuǎn)端胃腺癌的表達(dá)未見明顯差異。
　　 3、賁門腺癌中p15INK4b和CDK4的表達(dá)均與分化程度和有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)，而CyclinD1僅與分化程度相關(guān)。遠(yuǎn)端胃腺癌中僅p15INK4b、CyclinD1的表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)，提示p15INK4b、CyclinD1和CDK4在賁門腺癌和遠(yuǎn)端胃腺癌中的表達(dá)及臨