核苷(酸)類似物相關(guān)HBV P基因區(qū)耐藥變異的焦磷酸測序及分析.pdf

1、背景與目的：慢性乙型肝炎(chronic hepatitis B,CHB)治療的關(guān)鍵是抗病毒治療。目前被我國國家食品藥品監(jiān)督管理局(State Food and Drug Administration,SFDA)批準(zhǔn)用于抗病毒治療的藥物主要包括兩類:干擾素(interferon,IFN)類與核苷(酸)類似物[nucleos(t)ide analogues,NA],后者包括拉米夫定(lamivudine,LAM)、阿德福韋酯(adefov

2、ir dipivoxil,ADV)、恩替卡韋(entecavir,ETV)與替比夫定(telbivudine,LdT)。NA對乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)具有明顯的抑制作用；但隨著用藥時間的延長,其HBV可能發(fā)生NA相關(guān)耐藥變異,相繼出現(xiàn)病毒學(xué)突破、生化學(xué)突破、肝炎發(fā)作與肝功能失代償?shù)取Ｒ虼硕ㄆ诒O(jiān)測耐藥、早期發(fā)現(xiàn)耐藥相關(guān)變異并給予有效的挽救治療對于治療成功具有重要意義。
　　 焦磷酸測序法作為一種新

3、興的基因測序方法,已有報道用于LAM耐藥檢測,與直接測序法的符合率高,且當(dāng)變異病毒株達5％～10％時即可檢出。本研究的目的是分析HBV P基因區(qū)核苷(酸)類似物相關(guān)10個位點的變異情況,為臨床合理選擇抗病毒藥物提供參考。
　　 材料和方法:采用焦磷酸測序法對核苷(酸)類似物治療并發(fā)生病毒學(xué)突破或不充分病毒學(xué)應(yīng)答的75例CHB患者HBV P基因區(qū)10個位點(rtIl69T、rtVl73L、rtL180M、rtA181V/T、rtT

4、184G、rtA194T、rtS202I、rtM204V/I、rtN236T、M205V)進行檢測。對IAM耐藥時5種常見突變模式間HBV-DNA水平及ADV耐藥時不同突變模式間HBV-DNA水平進行比較。
　　 結(jié)果:①LAM相關(guān)耐藥48例,發(fā)現(xiàn)4個耐藥位點呈8種模式,以rtM204為主；ADV10例,2個耐藥位點呈4種模式,以rtA181為主；ETV6例,7個耐藥位點呈4種模式,以rtT184多見；LdT4例,2個耐藥位點呈

5、2種模式,均存在rtM2041。②5種常見LAM不同耐藥變異模式間HBV-DNA水平差異無統(tǒng)計學(xué)意義(F=1.013,P=-0.413)；而ADV不同突變模式間HBV-DNA水平的差異有統(tǒng)計學(xué)意義(F=7.519,P=0.023),且rtA181V+N236T聯(lián)合變異組高于單一rtA181V位點變異組(P=0.01)。
　　 結(jié)論:①應(yīng)用NA可篩選出HBV P基因區(qū)的相關(guān)耐藥變異,病毒突破患者應(yīng)進行耐藥變異的檢測并行個體化治療。