雌激素對子宮內(nèi)膜癌細胞中乙二醛酶I表達的調(diào)控.pdf

1、背景：子宮內(nèi)膜癌是婦科常見的三大生殖道惡性腫瘤之一。近年來，隨著生活水平的提高、人口的老齡化、激素替代治療的廣泛應(yīng)用，子宮內(nèi)膜癌的發(fā)病率逐年升高。而對于子宮內(nèi)膜癌的病因雖然多年來一直不斷進行探索，但至今尚無明確的結(jié)論。子宮內(nèi)膜癌的流行病學(xué)調(diào)查顯示，80 ％～90 ％的子宮內(nèi)膜癌為Ⅰ型，即雌激素依賴型，主要與雌激素的過多刺激有關(guān)。而Ⅱ型子宮內(nèi)膜癌與雌激素的關(guān)系不大，因而又稱非雌激素依賴型。長期過度的雌激素刺激是子宮內(nèi)膜癌發(fā)生發(fā)展的高危因素

2、目前已基本得到肯定。但其具體的作用機制仍不清楚。肥胖、高血壓、糖尿病被稱為子宮內(nèi)膜癌的三聯(lián)征，這一系列代謝紊亂性疾病亦是子宮內(nèi)膜癌的高危因素。因此，了解雌激素與子宮內(nèi)膜癌代謝途徑中的關(guān)鍵基因之間是否存在聯(lián)系，將為進一步研究子宮內(nèi)膜癌的發(fā)病機制，以及對子宮內(nèi)膜癌的預(yù)防和治療提供新的指導(dǎo)方向。
　　 目的：本實驗旨在研究雌激素是否通過PI3K/AKT信號通路調(diào)控子宮內(nèi)膜癌細胞中乙二醛酶I(Glyoxalase I，Glo-I)的表達

3、，以及對細胞增殖活性的影響。探討Glo-I是否可以作為治療子宮內(nèi)膜癌的新的靶點。
　　 方法：實驗以不同濃度（Con、10-11、10-10 、10-9 M）的雌激素(17-β雌二醇) 作用于人子宮內(nèi)膜癌Ishikawa和KLE細胞株，采用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)檢測KLE細胞中Glo-I mRNA的表達。通過RT-PCR及Western blot檢測雌激素(17-β雌二醇)處理或PI3K/AKT信號通路抑制劑(LY2

4、94002)處理后細胞中Glo-I mRNA及蛋白的表達情況，MTT法檢測各種藥物處理后的細胞增殖活性。將兩種細胞各分為四組：Con組（對照組）；LY294002組（LY294002處理組）；E2組（17-β雌二醇處理組）；E2＋LY294002組（LY294002預(yù)處理1小時后再用17-β雌二醇處理組）。
　　 結(jié)果：⑴經(jīng)不同濃度的17-β雌二醇（Con、10-11、10-10 、10-9 M）作用于Ishikawa和KLE細

5、胞24小時后，Ishikawa細胞中Glo-Ⅰ mRNA的相對表達量分別為1，1.39±0.03,2.05±0.02,1.05±0.02；KLE細胞中Glo-ⅠmRNA的相對表達量分別為1, 1.58±0.04，1.82±0.03，1.81±0.04，兩者均以10-10 M的濃度時表達量達到最高峰（P<0.05）。以10-10 M的17-β雌二醇作用于Ishikaw細胞和KLE細胞48小時后, Glo-Ⅰ 蛋白的相對表達量分別為1.20

6、±0.04,1.79±0.02,高于Con組。⑵以LY294002抑制AKT途徑后，Ishikawa細胞中Glo-Ⅰ mRNA的相對表達量為0.91±0.02，蛋白的相對表達量為0.49±0.03；KLE細胞中Glo-Ⅰ mRNA的相對表達量為0.69±0.03，蛋白的相對表達量為0.16±0.02，均低于Con組。⑶Ishikawa細胞中E2＋LY294002組Glo-Ⅰ mRNA和蛋白的相對表達量分別為0.87±0.03、0.47±

7、0.02；KLE細胞中E2＋LY294002組Glo-Ⅰ mRNA和蛋白的相對表達量分別為1.02±0.04、1.01±0.03，兩組細胞均低于相應(yīng)E2組中Glo-ⅠmRNA和蛋白的相對表達量。⑷Ishikawa細胞和KLE細胞的E2組的細胞相對增殖活性,均相對于Con組增高；LY294002組的細胞相對增殖活性，均相對于Con組降低；E2+LY294002組均較E2組降低。
　　 結(jié)論：雌激素可上調(diào)子宮內(nèi)膜癌細胞中Glo-Ⅰm