NBD小分子多肽對(duì)大鼠實(shí)驗(yàn)性重癥急性胰腺炎的作用研究.pdf

1、【目的】通過5％?；悄懰徕c(sodium taurocholate)逆行膽胰管注射建立大鼠實(shí)驗(yàn)性重癥急性胰腺炎(SCVCrC acute pancreatitis，SAP)體內(nèi)模型，探討核因子-kB(nuclear factor-kappaB，NF-kB)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑及其介導(dǎo)的白細(xì)胞介素-6(interleukin-6，IL-6)、腫瘤壞死因子(tumor necrosis factor-alpha，TNF-a)在大鼠實(shí)驗(yàn)性SAP發(fā)病過

2、程中的作用；通過NF-KB必需調(diào)節(jié)蛋白結(jié)合域(NF-KB essentialmodifier binding domain，NBD)多肽預(yù)處理，觀察對(duì)大鼠SAP的干預(yù)作用，為SAP的治療提供新的靶點(diǎn)。 【方法】根據(jù)隨機(jī)對(duì)照試驗(yàn)將Sprague-Dawley大鼠分為：假手術(shù)組，SAP組，TAT多肽組，NBD多肽組，TAT-NBD(WT)多肽組，TAT-NBD(MT)多肽組。采用逆行胰膽管內(nèi)注射5％STC(1ml/Kg)制備大鼠SA

3、P模型。每組大鼠均于術(shù)前30min腹腔注射預(yù)處理。術(shù)后6h，12h處死大鼠，HE染色觀察胰腺組織病理，人工碘比色法測(cè)定血清淀粉酶，雙抗體夾心EUSA法測(cè)定血清白細(xì)胞介素-6(interleukin-6，IL-6)，腫瘤壞死因子a(tumor necrosis factor-a，‘TlhrF-a)水平，S．P免疫組織化學(xué)法檢測(cè)胰腺組織NF-KB P65蛋白的變化。硫代巴比妥酸(TBA)比色法測(cè)胰腺組織MDA含量，黃嘌呤氧化酶法檢測(cè)T-SO

4、D活力。 【結(jié)果】 1胰腺病理變化假手術(shù)組大鼠腹腔未見腹水，胰腺組織肉眼及光鏡觀察基本正常。其他各組動(dòng)物處死時(shí)肉眼可見容量不等的血性腹水；肉眼及光鏡下可見胰腺、胰腺旁組織有不同程度的出血、水腫和壞死，鈣化灶形成。模型組的12h胰腺組織病理學(xué)評(píng)分均比6h高(P<0.05)。同SAP組比較，對(duì)應(yīng)的時(shí)間點(diǎn)NBD多肽組和TAT-NBD(WT)多肽組的病理學(xué)評(píng)分下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，且TAT-NBD(WT)多肽組下

5、降較NBD多肽組更為明顯(P<0.05)。 2 血清淀粉酶變化各模型組間12h的淀粉酶均比6h高(P<0.05)。同假手術(shù)組相比，SAP組血清淀粉酶明顯升高(P<0.01)，但是各模型組間的淀粉酶值差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。 3 血清TNF-a，IL-6變化SAP組12h的血清炎癥因子TNF-a，IL-6水平均比6h高(P<0.05)且比相應(yīng)的假手術(shù)組也明顯升高(P<0.05或P<0.01)。同SAP組比較，對(duì)應(yīng)

6、的時(shí)間點(diǎn)NBD多肽組和TAT-NBD(WT)多肽組TNF-a，IL-6水平下降(P<0.05)，且TAT-NBD(WT)多肽組下降較NBD多肽組更為明顯(P<0.05)。 4 胰腺組織NF-KB P65蛋白表達(dá)變化假手術(shù)組NF-KB P65蛋白表達(dá)低下。SAP組12h的NF-KB P65蛋白表達(dá)均比6h高(P<0.05)且比相應(yīng)的假手術(shù)組也明顯升高(P<0.05)。同SAP組比較，對(duì)應(yīng)的時(shí)間點(diǎn)NBD多肽組和TAT-NBD(WT)

7、多肽組NF-KB P65蛋白表達(dá)下降(P<0.05)，TAT-NBD(WT)多肽組下降較NBD多肽組更明顯(P<0.05)。5胰腺組織MDA，T-SoD變化SAP組胰腺組織MDA生成明顯增加，T-SOD活力下降(P<0.01或P<0.05)。同SAP組比較，NBD多肽組和TAT-NBD多肽(WT)處理組MDA生成減少，T-SOD活力升高(P<0.05)，且TAT-NBD多肽(WT)較NBD多肽組改變明顯(P<0.05)。 【結(jié)論

8、】 1．SAP大鼠血清淀粉酶明顯升高，但是和胰腺組織的病變程度并不平行。 2．SAP時(shí)大鼠胰腺組織的NF-KB過度激活，炎癥因子TNF-a、IL-6的表達(dá)與NF-KB活性正相關(guān)，MDA生成增加，T-SOD活力下降，共同參與了SAP發(fā)生和發(fā)展。 3．NBD多肽處理后可以抑制NF-KB的過度活化，下調(diào)炎癥因子TNF-a、IL-6的表達(dá)，減少M(fèi)DA生成，提高T-SOD活力，改善胰腺組織病變程度。 4．NBD多肽