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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:
探討脂多糖、鈣/鈣調(diào)素依賴性蛋白激酶Ⅱ抑制劑KN62預(yù)處理對(duì)三硝基苯磺酸(TNBS)誘導(dǎo)的小鼠炎癥性腸病的影響,并對(duì)結(jié)腸組織內(nèi)IL-6mRNA及MHC-Ⅱ類分子的活性表達(dá)水平進(jìn)行檢測(cè)。
方法:
將禁食24小時(shí)、不禁飲的40只BALB/C雌性小鼠隨機(jī)分為四組,每組10只:分別為正常對(duì)照組(NC組)、模型對(duì)照組(UC組)、脂多糖組(LPS組)、鈣/鈣調(diào)素依賴性蛋白激酶抑制劑組(KN62組)。
2、LPS組、KN62組、UC組小鼠分別預(yù)先腹腔注射LPS溶液(5mg/kg)、KN62溶液(25ng/小鼠)、生理鹽水,2小時(shí)后再予100mg/kg2,4,6-三硝基苯磺酸乙醇溶液(總體積100μl)灌腸;NC組予等體積生理鹽水結(jié)腸灌注。于造模后第7天處死小鼠,觀察指標(biāo)包括:疾病活動(dòng)指數(shù)(DAI),結(jié)腸粘膜病理組織學(xué)損傷評(píng)估(HI),RT-PCR法檢測(cè)各組結(jié)腸粘膜中IL-6mRNA表達(dá)的水平,流式細(xì)胞儀檢測(cè)結(jié)腸固有層單個(gè)核細(xì)胞MHC-Ⅱ類
3、分子活性的表達(dá)水平。
結(jié)果:
造模第7天,模型對(duì)照組(UC)的DAI、結(jié)腸粘膜病理組織學(xué)評(píng)分明顯高于正常對(duì)照組(NC組)(8.75±0.91vs0;10.92±0.93vs1.80±0.58,均p<0.05),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;LPS組DAI、結(jié)腸粘膜病理組織學(xué)評(píng)分高于UC組(10.68±1.16 vs8.75±0.91;13.54±1.12vs10.92±0.93,均P<0.05),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;KN6
4、2組的DAI、結(jié)腸粘膜病理組織學(xué)評(píng)分低于UC組(4.36±0.52vs8.75±0.91;5.47±0.81vs10.92±0.93,均P<0.05),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;UC組結(jié)腸粘膜的IL-6mRNA及MHC-Ⅱ類分子活性的表達(dá)都高于NC組(0.53±0.21vs0.14±0.12;4.97±0.23 vs1.26±0.11,均p<0.05),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;各項(xiàng)檢測(cè)指標(biāo)在LPS組高于UC組(0.71±0.25vs0.53±0.21
5、;7.32±0.14 vs4.97±0.23,均p<0.05);KN62組低于UC組(0.38±0.13 vs0.53±0.21;2.38±0.16 vs4.97±0.23,均P<0.05),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
結(jié)論:
1.比較模型對(duì)照組小鼠和正常對(duì)照組小鼠疾病活動(dòng)度指數(shù)、結(jié)腸粘膜病理組織學(xué)損傷評(píng)估、IL-6mRNA及MHC-Ⅱ類分子活性的表達(dá)等指標(biāo),提示予5%TNBS乙醇溶液(100mg/kg)灌腸能夠誘導(dǎo)
6、出實(shí)驗(yàn)性結(jié)腸炎動(dòng)物模型。
2采用較大劑量脂多糖(LPS)干預(yù)后,該模型組小鼠結(jié)腸粘膜中IL-6的表達(dá)和結(jié)腸粘膜固有層單核細(xì)胞中MHC-Ⅱ類分子活性的表達(dá)明顯增加,臨床癥狀加重,病理組織學(xué)表現(xiàn)顯著惡化,提示脂多糖可明顯增強(qiáng)組織細(xì)胞IL-6的轉(zhuǎn)錄水平,進(jìn)而加重實(shí)驗(yàn)性小鼠結(jié)腸炎癥反應(yīng)。
3采用鈣/鈣調(diào)素依賴性蛋白激酶抑制劑(KN62)干預(yù)后,該模型組小鼠結(jié)腸粘膜中IL-6的表達(dá)下調(diào),結(jié)腸粘膜固有層單核細(xì)胞中MHC-
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