FoxO3a-p27kip1信號輛在白藜蘆醇抑制AngⅡ誘導HA-VSMC增殖機制中的作用.pdf

1、目的:探討FoxO3a/p27kip1信號軸是否介導白藜蘆醇抑制AngⅡ誘導血管平滑肌細胞增殖、遷移作用。
　　方法:體外培養(yǎng)人主動脈血管平滑肌細胞HA-VSMC，不同濃度AngⅡ、白藜蘆醇或二者聯(lián)用干預(yù)HA-VSMC，MTT法檢測細胞活性，臺盼藍染色法鑒定白藜蘆醇抑制HA-VSMC的作用是否由藥物的細胞毒性引起，劃痕愈合法檢測細胞遷移能力。Western blot檢測AngⅡ、白藜蘆醇或二者聯(lián)用作用不同時間對HA-VSMC細胞F

2、oxO3a、p-FoxO3a、p27kip1表達的影響。
　　結(jié)果:1.AngⅡ干預(yù)HA-VSMC48h，當濃度≥10-7mol/L時細胞增殖活性明顯增強，與對照組比較差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)，濃度與HA-VSMC細胞相對活力呈正相關(guān)，r=0.91，P=0.01。
　　2.白藜蘆醇干預(yù)HA-VSMC48h，相對細胞活力降低，與對照組比較差異均有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。臺盼藍染色結(jié)果示白藜蘆醇濃度≥20μmol/L

3、時細胞活率下降，與對照組比較差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)，濃度與HA-VSMC細胞存活率呈負相關(guān)，r=-0.97，P=0.04。
　　3.白藜蘆醇預(yù)處理HA-VSMC40min，AngⅡ干預(yù)48h，AngⅡ+白藜蘆醇組細胞活力下降，視野遷移細胞平均數(shù)減少，與Ang組比較差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)，AngⅡ增強HA-VSMC遷移活性，與對照組比較差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)，白藜蘆醇組細胞遷移活性減弱，與對照組比較差異

4、有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。
　　4.AngⅡ呈時間依賴性上調(diào)HA-VSMC磷酸化FoxO3a蛋白表達水平，與對照組比較差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)，不影響其總蛋白表達水平。
　　5.白藜蘆醇干預(yù)下調(diào)HA-VSMC細胞磷酸化FoxO3a蛋白表達，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)，且不影響其總蛋白表達水平。
　　6.白藜蘆醇抑制AngⅡ誘導FoxO3a蛋白磷酸化，與AngⅡ組比較差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)，A

5、ngⅡ下調(diào)HA-VSMC p27kip1蛋白表達，與對照組比較差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)，白藜蘆醇預(yù)處理則上調(diào)p27kip1蛋白表達，與AngⅡ組比較差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。
　　結(jié)論:1.AngⅡ呈濃度依賴性促進HA-VSMC增殖，呈時間依賴性誘導HA-VSMC中FoxO3a蛋白磷酸化。
　　2.白藜蘆醇呈濃度依賴性抑制HA-VSMC細胞活性，有效抑制HA-VSMC中FoxO3a蛋白磷酸化。
　　3.