黃芪對同種移植受體糖皮質激素受體和皮質醇的影響及意義.pdf

1、目的意義:
　　 糖皮質激素(GC)是目前臨床應用最廣泛的免疫抑制劑，但是它只有與糖皮質激素受體(GR)結合才能發(fā)揮其免疫抑制作用。近年來，隨著受體放射配基結合分析法(RBA，Radioligang Binding Assay)的完善和分子生物學的快速發(fā)展，GR的研究日趨活躍。研究表明，測定移植受體的GR對闡明免疫抑制劑的作用機制和指導臨床治療均具有重要作用。
　　 皮質醇是內源性糖皮質激素，血清皮質醇水平與機體GR密切

2、相關，在研究移植受體GR的同時，分析血清皮質醇的變化，對于了解移植受體糖皮質激素的代謝狀況，指導抗排斥治療具有重要意義。
　　 近年來，隨著免疫抑制治療的發(fā)展，同種器官移植的成功率明顯提高。理想的免疫抑制劑應該既能消除移植受體的排斥反應又不會造成免疫缺陷。臨床常用的免疫抑制劑包括：化學藥物免疫抑制劑（如環(huán)磷酰胺、環(huán)胞素A等）和抗體類生物免疫抑制劑，雖然在一定程度上能夠延長患者生存時間，但其毒副作用較嚴重（如：骨髓抑制、嚴重的肝腎

3、毒性等），往往因為患者不能耐受而停止用藥，而且這些藥物價格昂貴，經濟上亦難以承受。因此開發(fā)新型高效低毒的免疫抑制劑已成為目前研究的熱點。
　　 中藥黃芪可以補氣益氣。研究表明不同劑量的黃芪對機體免疫功能的影響不同，黃芪具有免疫增強和免疫抑制的雙重調節(jié)作用。本實驗室前期研究發(fā)現(xiàn)黃芪注射液體內應用可以明顯延長同種移植物生存時間，但是其具體作用機制，尤其是對糖皮質激素代謝的影響尚不清楚。
　　 本課題在成功建立小鼠同種皮膚移植

4、模型的基礎上，利用受體的放射配基結合分析和放射免疫分析法，探討了中藥黃芪注射液(AMI)體內應用后糖皮質激素受體和血清皮質醇的變化及對同種移植物生存的影響，旨在為臨床應用黃芪注射液抗移植排斥奠定實驗基礎。
　　 方法:
　　 1、建立同種移植小鼠模型；
　　 2、體內應用中藥黃芪(AMI)后，逐日觀察同種移植小鼠移植物生存狀況；
　　 3、應用受體放射配基結合分析測定同種皮膚移植后不同時間脾細胞糖皮質激素

5、受體(GR)結合位點；應用RT-PCR測定GRmRNA水平；
　　 4、利用放射免疫分析檢測皮片移植后不同時間的血清皮質醇水平。
　　 結果:
　　 1、同種移植早期小鼠脾細胞GR結合位點數(shù)和血清皮質醇明顯升高，此后逐漸下降，在排斥高峰期（第14d）達到最低值。
　　 2、單用AMI(60g/kg)或環(huán)磷酰胺(CTX，100mg/kg)及二者聯(lián)合應用均可顯著延長同種移植物的生存時間，二者聯(lián)合應用組小鼠的生