腫瘤射頻消融裂解物致敏的DC瘤苗聯(lián)合CIK細(xì)胞抗腫瘤活性的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：探討腫瘤射頻消融原位裂解物致敏樹(shù)突狀細(xì)胞(DC)的瘤苗聯(lián)合細(xì)胞因子誘導(dǎo)殺傷活性細(xì)胞(CIK)的抗腫瘤活性。
　　方法：制備BALB/C小鼠骨髓來(lái)源的DC及脾臟來(lái)源的CIK細(xì)胞,建立射頻消融滅活BALB/C小鼠皮下結(jié)腸癌移植瘤的實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ?將其原位裂解的腫瘤組織反復(fù)凍融后取上清,采用lowry蛋白定量法定量,以終濃度5μg/ml負(fù)載培養(yǎng)第5d的DC(即Ag-DC),2d后再與培養(yǎng)第7d的CIK細(xì)胞共培養(yǎng)48h。應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)分析

2、其表面共刺激分子的表達(dá),使用CCK-8法檢測(cè)其體外殺傷活性。建立4組腫瘤治療與預(yù)防模型分別是Ag-DC-CIK組,DC-CIK組,CIK組與PBS對(duì)照組,采用ANOVA方差分析比較各組間種植瘤體積的變化趨勢(shì),Log-rank檢驗(yàn)比較各組小鼠的生存時(shí)間。
　　結(jié)果：Ag-DC表面表達(dá)CD80、CD86、MHC-II、CD11c分別為86.3％、29.4％、75.4％、82.5％;未處理的DC表面表達(dá)CD80、CD86、MHC-II、

3、CD11c分別為68.6％、15.1％、64.5％、66.7％;小鼠腫瘤預(yù)防模型提示各組7天成瘤率分別為:Ag-DC-CIK組60％(3/5)、DC-CIK組80％(4/5)、CIK組80％(4/5)、PBS對(duì)照組100％(5/5);且Ag-DC-CIK組小鼠的腫瘤體積生長(zhǎng)緩慢,與DC-CIK組、CIK組、DC組和PBS對(duì)照組的小鼠相比,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F1=165.48,F2=151.54,P<0.00)。治療模型提示:Ag-DC-

4、CIK組小鼠的平均生存期(44±3)d,DC-CIK組小鼠的平均生存期(34±10)d, CIK組小鼠的平均生存期(26±4)d,PBS對(duì)照組小鼠的平均生存期(22±3)d,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.01);且Ag-DC-CIK組小鼠的腫瘤體積生長(zhǎng)緩慢,與DC-CIK組、CIK組和PBS對(duì)照組的免疫小鼠相比,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F1=69.90,F2=33.71,P﹤0.00)。
　　結(jié)論：負(fù)載腫瘤射頻消融原位裂解產(chǎn)物的DC細(xì)胞聯(lián)合