職業(yè)接觸苯尿中粘糠酸測(cè)定方法及其生物限值研究.pdf

1、苯是重要的工業(yè)化學(xué)原料，廣泛存在于生產(chǎn)環(huán)境與生活環(huán)境中，由于苯對(duì)人體有多種毒性，并已被確認(rèn)為人類(lèi)致癌物，因此監(jiān)督和控制苯暴露尤其重要。大部分尿中代謝物和尿中原形苯被作為苯暴露的生物標(biāo)志物而被廣泛研究。短期苯暴露的生物標(biāo)志物主要是苯尿中代謝物(暴露幾小時(shí)后)，包括苯酚、兒茶酚、氫醌、苯三酚、苯巰基尿酸和反反式粘糠酸；血蛋白加合物(暴露幾天或幾周后)，包括氧化苯和血白蛋白內(nèi)加合物苯醌。長(zhǎng)期苯暴露(暴露數(shù)月或數(shù)年后)的生物標(biāo)志物主要是染色體的

2、改變。尿中苯巰基尿酸和反反式粘糠酸是短期苯暴露最好的生物標(biāo)志物，這兩種標(biāo)志物在未接苯工人體內(nèi)本底水平較低而在接苯工人體內(nèi)水平上升幅度較大，其中，苯巰基尿酸在接苯，尤其是低濃度苯水平下，在體內(nèi)變化幅度較大，更適合做苯尿中生物標(biāo)志物。但苯巰基尿酸的測(cè)定對(duì)儀器要求較高，而反反式粘糠酸檢測(cè)方法更易被基層接受、普及。尿中其他代謝物其本底值均高于苯巰基尿酸和反反式粘糠酸。接苯前后變化幅度較小，敏感性較差，不適合做低苯暴露時(shí)的生物標(biāo)志物。結(jié)合本研究中

3、心的實(shí)際情況和設(shè)備條件，對(duì)苯的生物標(biāo)志物做一系列的研究與比較后，選擇并研制我國(guó)職業(yè)接觸苯尿中生物標(biāo)志物之一，反-反式粘糠酸(ttMA)的生物限值并建立與此相配套的高效液相色譜(HPLC)測(cè)定尿中反-反式粘糠酸的方法。 本課題選擇武漢某鋼鐵公司共80人，身體健康，其中包括職業(yè)苯接觸者56人和非苯接觸者24人，應(yīng)用活性炭吸附管采集工人呼吸帶空氣、二硫化碳洗脫、毛細(xì)管氣相色譜法檢測(cè)個(gè)體外暴露水平，同時(shí)采集當(dāng)日工作班前和班末尿樣本，應(yīng)用

4、HPLC測(cè)定尿中ttMA以評(píng)價(jià)內(nèi)暴露水平。尿樣經(jīng)2mol/L鹽酸酸化、香草酸為內(nèi)標(biāo)、乙酸乙酯萃取預(yù)處理，采用ODSC18柱、冰乙酸-四氫呋喃-甲醇-水(體積比1：2：10：87)為流動(dòng)相、流速0.9ml/min、紫外檢驗(yàn)波長(zhǎng)264nm、柱溫25℃的色譜條件分離測(cè)定尿中ttMA。ttMA的線(xiàn)性范圍為0.10-10.00mg/L，檢出限為0.10mg/L，加標(biāo)平均回收率為95.1％-100.5％，批內(nèi)精密度、批間精密度變異系數(shù)分別為4.4％

5、-7.5％和6.2％-8.8％。檢測(cè)研究對(duì)象結(jié)果顯示，接苯工人空氣苯濃度范圍0.332～146mg/m3，平均濃度41.8mg/m3，班末尿ttMA與個(gè)體苯接觸量存在著良好線(xiàn)性關(guān)系Y(mg/gCr)=2.103+0.177X(mg/m3)，r=0.791，P＜0.01，將我國(guó)職業(yè)苯接觸限值TWA=6mg/m3代入回歸方程，推算工作班末尿中ttMA含量為3.165mg/gCr。 過(guò)去幾十年里，人們?cè)趧?dòng)物和人身上作了大量的研究，找出

6、高暴露接苯水平下的敏感生物標(biāo)志物。迄今為止，生物標(biāo)志物可以衡量總體內(nèi)攝取量、生物效應(yīng)劑量或作為可行標(biāo)記物。目前，低苯暴露對(duì)人類(lèi)健康的影響主要是由高濃度推斷到低濃度，或者由動(dòng)物實(shí)驗(yàn)推導(dǎo)到人，這種推導(dǎo)具有不確定因素。并且這些生物標(biāo)志物在低苯濃度下的應(yīng)用性和前瞻性也沒(méi)有完整的評(píng)估。人體內(nèi)苯轉(zhuǎn)化為反反式粘糠酸的代謝率約為2％，已經(jīng)證明苯是反反式粘糠酸的主要來(lái)源，因此，反反式粘糠酸對(duì)苯而言比較特殊。此外，反反式粘糠酸是由反反式粘糠醛轉(zhuǎn)化而來(lái)，而后