2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
已閱讀1頁,還剩9頁未讀, 繼續(xù)免費(fèi)閱讀

下載本文檔

版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請進(jìn)行舉報(bào)或認(rèn)領(lǐng)

文檔簡介

1、EffectsofehagenetoEdwardsiellatardaandit’SsurvivinginMacrophagesADissertationSubmitiedtoSoutheastUniversityFortheAcademicDegreeofMasterofMedicineBYLIYuhongSupervisedbyAssociatedProfessorGAODaqingSchooIofMedicineSoutheast

2、UniversityMay2013中文摘要幽a基因?qū)t緩愛德華菌及其在巨噬細(xì)胞內(nèi)存活的影響中文摘要遲緩愛德華菌(Edwardsiellatarda,簡稱Et)是一種重要的人獸共患病原菌,能夠在巨噬細(xì)胞內(nèi)生存和繁殖,是其致病的關(guān)鍵。Et溶血調(diào)控基因(Ethaemolysinactivatorgene,簡稱eha)是一個(gè)重要的轉(zhuǎn)錄調(diào)控基因,能夠調(diào)控Et的某些毒力因子。已有研究表明,eha基因可能與Et的胞內(nèi)生存有關(guān),但是該基因如何影響該菌的

3、胞內(nèi)生存機(jī)制及其毒力尚未闡明。WST-8和LDH細(xì)胞毒性檢測結(jié)果均表明,野生株的細(xì)胞毒性明顯高于eha缺失株,在電鏡和倒置光學(xué)顯微鏡下也觀察到這一現(xiàn)象。eha缺失株在SDS和多粘菌素B脅迫環(huán)境中的存活率明顯降低,表明eha基因的缺失可能影響Et菌體相關(guān)成分的合成。RT-PCR結(jié)果表明,野生株中外膜蛋白基因pagC的轉(zhuǎn)錄水平高于eha缺失株;qRT-PCR結(jié)果顯示eha缺失株dOpagC的轉(zhuǎn)錄水平為野生株的045倍。SDSPAGE電泳也顯

4、示,野生株的三種外膜蛋白表達(dá)水平高于eha缺失株,其中37kD外膜蛋白是誘導(dǎo)體液和細(xì)胞免疫保護(hù)抗體的重要抗原。因此,eha基因通過影響Et菌體相關(guān)成分的合成,影響Et菌在脅迫環(huán)境中的存活率。流式凋亡檢測和電鏡觀察結(jié)果顯示,eha缺失株感染細(xì)胞組的細(xì)胞凋亡率高于野生株感染細(xì)胞組,提示eha基因可抑制Et引起巨噬細(xì)胞凋亡的作用。RT-PCR結(jié)果顯示,eha基因上調(diào)Et中Ⅲ型分泌系統(tǒng)分泌蛋白C和鞭毛蛋白C的表達(dá),而Ⅲ型分泌系統(tǒng)可抑制宿主細(xì)胞的

5、凋亡。但是eha基因是否通過調(diào)控IⅡ型分泌系統(tǒng)的表達(dá)而影響Et對巨噬細(xì)胞的凋亡作用,還有待探討。通過Et感染RAW2647細(xì)胞,菌落計(jì)數(shù)法測定其胞內(nèi)存活及電鏡、光鏡觀察結(jié)果表明,野生株和eha缺失株均可在巨噬細(xì)胞內(nèi)存活和繁殖,但和野生株相比,eha缺失株在巨噬細(xì)胞內(nèi)的繁殖速率明顯下降。模擬巨噬細(xì)胞內(nèi)強(qiáng)氧化環(huán)境的應(yīng)激實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,相比野生株,eha缺失株對過氧化氫的敏感性顯著提高,在過氧化氫中的存活率明顯降低。流式檢測細(xì)菌感染后巨噬細(xì)胞產(chǎn)

6、生活性氧的水平,結(jié)果顯示,eha缺失株感染細(xì)胞組(6549%)高于野生株組(5532%)。進(jìn)一步用RT-PCR和qRT-PCR實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,eha基因的缺失下調(diào)了Et中過氧化氫酶和超氧化物歧化酶的轉(zhuǎn)錄水平;eha缺失株中sodC和勛燈的轉(zhuǎn)錄水平分別為野生株的01倍和042倍。這提示eha基因通過調(diào)控Et中過氧化氫酶和超氧化物歧化酶的表達(dá),從而影響其分解巨噬細(xì)胞中活性氧的能力和在不同濃度過氧化氫中的存活率。模擬巨噬細(xì)胞吞噬溶酶體中酸性環(huán)境

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預(yù)覽,若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
  • 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時(shí)也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

最新文檔

評論

0/150

提交評論