亞臨界R134a萃取-高效液相色譜聯(lián)用技術(shù)對(duì)水產(chǎn)品中激素殘留檢測(cè)的研究.pdf

1、近幾年新出現(xiàn)的亞臨界流體萃取技術(shù)，可以在比較低的壓力下實(shí)現(xiàn)比較好的萃取效果，克服了超臨界CO2萃取存在的一些缺點(diǎn)，因而受到了越來(lái)越多的重視。由于1，1，1，2-四氟乙烷(R134a)具有臨界條件(Tc=101.1℃，Pc=4.06 MPa)易于達(dá)到、低毒、惰性、不易燃以及不破壞臭氧層(ODP=0)等特點(diǎn)，所以成為亞臨界流體的首選。蛋白同化類激素，能促進(jìn)畜禽生長(zhǎng)，提高飼料轉(zhuǎn)化率，有利于蛋白質(zhì)的沉積，提高產(chǎn)量，而被用于水產(chǎn)養(yǎng)殖行業(yè)。但蛋白同

2、化激素在動(dòng)物食品中的殘留可能會(huì)危及消費(fèi)者的健康，具有潛在的致癌性。但由于利益驅(qū)動(dòng)，一些同化激素仍然被一些養(yǎng)殖戶偷偷使用，因此建立可靠、快速、方便、綠色的分析方法對(duì)水產(chǎn)品中激素殘留量進(jìn)行監(jiān)控是很有必要的。本文通過建立亞臨界R134a萃取-高效液相色譜連用技術(shù)對(duì)魚肉中激素殘留檢測(cè)進(jìn)行了研究。
　　 論文通過設(shè)計(jì)正交試驗(yàn)和響應(yīng)曲面，用亞臨界R134a流體萃取羅非魚肌肉中的丙酸睪酮、甲基睪酮和醋酸甲羥孕酮?dú)埩簦?jīng)過傳統(tǒng)液-液萃取和C18

3、固相萃取小柱除雜，然后用高效液相色譜儀檢測(cè)。探討了萃取壓力、萃取溫度、萃取時(shí)間、共溶劑用量等多種因素對(duì)激素回收率的影響作用，并對(duì)不同種類的性激素，進(jìn)行了萃取條件的優(yōu)化選擇。實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下：
　　 1.用正交試驗(yàn)優(yōu)化了亞臨界R134a萃取魚肉中丙酸睪酮?dú)埩簦状际占河檬兔衙撝兓?，然后用高效液相色譜儀檢測(cè)。得到最佳的實(shí)驗(yàn)條件：萃取壓力14 MPa，萃取溫度23℃，R134a流量10g/min，靜態(tài)萃取30min，動(dòng)態(tài)萃取40 m

4、in，共溶劑甲醇添加量2 mL，收集液為甲醇。根據(jù)極差大小，可以判斷各因素對(duì)丙酸睪酮回收率的影響程度，因素的主次關(guān)系為：萃取壓力>動(dòng)態(tài)萃取時(shí)間>萃取溫度。在最優(yōu)條件下，方法靈敏度高，重現(xiàn)性好，檢出限為2.0μg/kg，丙酸睪酮的加標(biāo)回收率均大于90％、相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)小于5％。
　　 2.用響應(yīng)曲面優(yōu)化了亞臨界R134a萃取魚肉中甲基睪酮?dú)埩?，甲醇收集液用C18固相萃取小柱純化，然后用高效液相色譜儀檢測(cè)。得到最佳的實(shí)驗(yàn)條件

5、：萃取壓力5 MPa、萃取溫度31℃、共溶劑甲醇用量3.35 mL、靜態(tài)萃取30 min，動(dòng)態(tài)萃取40 min，R134a流量10g/min。在最優(yōu)條件下，方法靈敏度高，重現(xiàn)性好，檢出限為5.0μg/kg，甲基睪酮的加標(biāo)回收率均大于90％，RSD小于3％。通過對(duì)模型的分析發(fā)現(xiàn)，共溶劑甲醇用量極顯著，萃取壓力和萃取溫度顯著，二次項(xiàng)萃取壓力和共溶劑用量顯著，萃取壓力和共溶劑用量的交互作用顯著。
　　 3.用響應(yīng)曲面優(yōu)化了亞臨界R13

6、4a萃取魚肉中醋酸甲羥孕酮?dú)埩?，甲醇收集液用C18固相萃取小柱純化，然后用高效液相色譜儀檢測(cè)。得到最佳的實(shí)驗(yàn)條件：萃取壓力3 MPa、萃取溫度25℃、共溶劑甲醇用量6mL、靜態(tài)萃取30min，動(dòng)態(tài)萃取40min，R134a流量10 g/min。在最優(yōu)實(shí)驗(yàn)條件下，方法靈敏度高，重現(xiàn)性好，檢出限為5.0μg/kg，醋酸甲羥孕酮的加標(biāo)回收率均大于95％，RSD小于5％。通過對(duì)模型的分析發(fā)現(xiàn)，共溶劑甲醇用量極顯著，萃取壓力和共溶劑用量的交互作用