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1、高效液相色譜法目前已廣泛應(yīng)用于天然產(chǎn)物中生物活性化合物的分離。本文成功建立了啤酒花浸膏中有效成分的高效液相色譜分離純化工藝,并對(duì)最終產(chǎn)物進(jìn)行表征和定性驗(yàn)證。
首先通過色譜條件優(yōu)化建立了啤酒花浸膏的HPLC分析方法,6種有效成分(葎草酮、加葎草酮、合葎草酮、蛇麻酮、加蛇麻酮、合蛇麻酮)均達(dá)到基線分離,為進(jìn)一步有效成分的放大制備和純度檢測(cè)奠定基礎(chǔ)。葎其次依據(jù)高效液相制備色譜的線性放大理論及質(zhì)量超載和體積超載等相關(guān)實(shí)驗(yàn),確定了制
2、備色譜條件:在室溫下,采用Hypersil C18 10μm色譜柱,流動(dòng)相為V(乙醇)/V(0.2%冰乙酸水溶液)=65/35,流速15.0mL/min,進(jìn)樣量90mg,檢測(cè)波長(zhǎng)為UV315nm。在此制備條件下收集餾分,通過考察不同的后處理方法除去溶劑,最終確定最佳后處理方案為:先將餾分旋蒸濃縮,再經(jīng)SPE萃取,之后氮吹,干燥得到黃色浸膏狀產(chǎn)物。
最后,采用分析型HPLC法對(duì)純化的固體產(chǎn)物進(jìn)行純度檢測(cè),純度高,均在90%以
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