菜籽多糖的分離、純化及特性研究.pdf

1、以低溫冷榨菜籽粕為材料、低堿浸提和串聯(lián)超濾為主要分離手段，進行菜籽蛋白聯(lián)產(chǎn)菜籽粗多糖(PRM)的效果研究。采用DEAE-纖維素樹脂從PRM中分離出多糖單組分。探討了PRM的免疫活性及體內抗氧化活性；對菜籽多糖單組分的化學組成進行分析與分子表征，同時考察其體外抗氧化活性，為菜籽多糖的工業(yè)化生產(chǎn)和應用提供理論依據(jù)。
　　 PPM的制備、菜籽多糖單組分的分離、菜籽多糖單組分的化學組成分析與分子表征。低溫冷榨菜籽粕依次通過脫脂預處理，0

2、.3％NaOH溶液浸提，溶液過濾去除大顆粒雜質后，Sevage(氯仿：正丁醇，4：1)試劑去除溶液中蛋白質。上清液依次經(jīng)過透析、濃縮、95％酒精沉淀后，收集的多糖依次經(jīng)過無水乙醇、丙酮和乙醚洗滌后，得到粗多糖(PRM)。PRM再用DEAE-纖維素-52層析柱進一步分離，依次用蒸餾水和0.05MNaCl溶液洗脫。相應的流出液分別經(jīng)透析和冷凍干燥，得到兩個菜籽多糖單組分。分析了菜籽多糖單組分的中性多糖、硫酸根、蛋白質和糖醛酸含量，氨基酸組成

3、和分子量；采用GC-MS法分析菜籽多糖單組分中的單糖組成；通過剛果紅試驗檢驗菜籽多糖單組分的多股螺旋結構。
　　 菜籽多糖中試制備工藝研究?？疾炝私帷⒎鬯楹湍し蛛x條件對多糖得率和純度的影響。確定了菜籽多糖的最佳的浸提、粉碎和膜分離條件。并且，采用高效液相色譜法對得到的菜籽多糖的分子量范圍及正態(tài)分布進行研究。
　　 探討了PRM的免疫活性。以小白鼠為試驗動物，分成對照組、低劑量組、中劑量組和高劑量組四組，連續(xù)灌胃30天后

4、，測定小白鼠的胸腺和脾臟指數(shù)，吞噬細胞的吞噬能力，脾細胞和腹腔巨噬細胞的增殖，遲發(fā)型過敏反應和溶血空斑和溶血素抗體形成等免疫指標，綜合評價PPM對小白鼠的免疫功能的影響。
　　 研究了PRM的體內抗氧化活性。選用生理鹽水為載體，維生素C和維生素E作為陽性對照組，灌胃喂養(yǎng)小白鼠PRM。喂養(yǎng)30天后。測定被飼小鼠的血清、肝臟、心臟和小腸中谷胱甘肽過氧化酶(GSH-PX)、超氧化物歧化酶(SOD)和過氧化氫酶(CAT)的活力，總抗氧化

5、力(T-AOC)和丙二醛(MDA)含量，評價PRM對試驗小鼠抗氧化能力的影響。試驗結果表明：菜籽多糖能顯著性提高小白鼠體內GSH-Px、SOD和CAT的活性及T-AOC水平，降低MDA的含量。因此，PRM能提高小白鼠的體內抗氧化能力。
　　 以維生素C為陽性對照組，以超氧陰離子自由基、羥基自由基、一氧化氮自由基的捕獲能力，還原力及對線粒體脂質氧化的抑制率為指標，評價兩個菜籽多糖單組分的體外抗氧化活性。試驗結果表明：兩個菜籽多糖單