牛奶中β-內(nèi)酰胺類與多肽類抗生素檢測方法的研究.pdf

1、β-內(nèi)酰胺類類藥物和多肽類抗生素是畜禽養(yǎng)殖過程中最常用的兩類獸藥，經(jīng)常攝入β-內(nèi)酰胺類藥物和多肽類抗生素殘留的食品，會造成體內(nèi)微生物系統(tǒng)失衡，產(chǎn)生抗藥性，若蓄積含量過高，還會造成腎毒性等毒副作用。本文以β-內(nèi)酰胺類和多肽類抗生素的檢測為研究目標(biāo)，通過優(yōu)化前處理?xiàng)l件:（1）β-內(nèi)酰胺類抗生素檢測：采用乙腈沉淀牛奶樣品中的蛋白，磷酸鹽緩沖溶液為提取液，20kHz超聲5min，離心處理，固相萃取小柱凈化，采用Agilent TC C18:(1

2、50xnmx4.6mmi.d，5um)色譜柱，選用磷酸鹽-甲醇作流動相進(jìn)行梯度洗脫，流速1.0ml/min，220nm檢測，在22min內(nèi)分離檢測，在1-10ug/ml范圍內(nèi)，9種抗生素均有良好線性，檢測限在0.5-2.5ug/L之間。（2）多肽類抗生素檢測：牛奶樣品經(jīng)甲醇-0.1％甲酸水提取后，用6%三氯乙酸乙腈（牛奶4%）除蛋白，液液萃取后，采用0.1%甲酸水（A）和0.1%甲酸乙腈（B）作為流動相進(jìn)行梯度洗脫，質(zhì)譜（ESI+）采用

3、多離子檢測模式（MRM）對兩價(jià)態(tài)或三價(jià)態(tài)的定性和定量離子進(jìn)行監(jiān)測。結(jié)果表明五種多肽類抗生素在25μg/kg、50μg/kg、100μg/kg三個(gè)添加濃度上回收率范圍為75.1%~120%，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差小于15.7；方法檢出限在0.1μg/kg-5.6μg/kg。證明本試驗(yàn)可以有效檢出牛奶中β-內(nèi)酰胺類、多肽抗生素的殘留，在實(shí)踐中可以作為一種檢測牛奶中β-內(nèi)酰胺類、多肽類抗生素的檢測手段。本試驗(yàn)為供乳制品企業(yè)和基層質(zhì)檢部門對日常乳制品的質(zhì)