中成藥、保健食品及動(dòng)物源性食品中22種苯二氮（卓）類藥物檢測(cè)方法研究.pdf

1、苯二氮（卓）類藥物(Benzodiazepines，BZDs)多為1，4-苯并二氮（卓）的衍生物，臨床常用的有20余種，因其具有鎮(zhèn)靜催眠、抗焦慮、抗驚厥和肌肉松弛作用[1]，常被不法廠商添加于鎮(zhèn)靜安神類中成藥及保健食品中，以增強(qiáng)其療效;或被個(gè)別畜牧業(yè)飼養(yǎng)者作為生長(zhǎng)促進(jìn)劑添加于飼料中[2]，使動(dòng)物嗜睡少動(dòng)，減少動(dòng)物維持體能的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消耗，有益于增重;或在動(dòng)物運(yùn)輸和屠宰過程中使用，減輕動(dòng)物機(jī)體對(duì)不良刺激的反應(yīng)，降低死亡率，防止肉質(zhì)的變化。但

2、服用BZDs可產(chǎn)生頭暈嗜睡、乏力、昏迷、呼吸抑制等副作用，長(zhǎng)期服用容易產(chǎn)生耐受性、依賴性和成癮性[3]。因此，我國(guó)《藥品管理法實(shí)施條例》與《食品衛(wèi)生法》明確規(guī)定，禁止在中成藥及保健食品中添加化學(xué)藥物成分。農(nóng)業(yè)部第176號(hào)公告規(guī)定在動(dòng)物飼料和飲用水中嚴(yán)禁使用BZDs。因此，建立檢測(cè)中成藥、保健食品及動(dòng)物源性食品中BZDs的含量方法具有重要意義。
　　本實(shí)驗(yàn)通過對(duì)樣品前處理方法和儀器分析條件的系統(tǒng)優(yōu)化，建立了靈敏、準(zhǔn)確、快速、實(shí)用，能

3、同時(shí)檢測(cè)中成藥、保健食品和動(dòng)物源性食品中22種BZDs的LC-MS/MS分析方法，全文由三部分構(gòu)成。
　　第一部分LC-MS/MS同時(shí)檢測(cè)中成藥及保健食品中非法添加22種BZDs的方法研究。
　　目的:建立同時(shí)檢測(cè)中成藥及保健食品中22種BZDs的LC-MS/MS方法。方法:中成藥及保健食品樣品中的BZDs在pH為11的硼砂緩沖溶液中，經(jīng)乙醚-二氯甲烷(8∶2，V/V)提取，濃縮至干后用乙腈-水(2∶8，V/V)定容檢測(cè)。色

4、譜柱:Shimadzu VP-ODS(150 mm×2.0 mm，5.0μm);流動(dòng)相:A:乙腈，B:2 mmol/L乙酸銨水溶液（含0.2％甲酸），梯度洗脫;流速:0.30 mL/min;柱溫:40℃;進(jìn)樣量:30μL。質(zhì)譜條件:電噴霧正離子檢測(cè)模式(ESI+)，多反應(yīng)監(jiān)測(cè)(MRM);電噴霧電壓:5.5 KV;霧化氣壓力:0.448MPa;氣簾氣壓力:0.310 MPa;輔助氣流速:0.207 MPa;碰撞氣流速:0.069 MPa;

5、離子源溫度:650℃;碰撞室入口電壓為10V，碰撞室出口電壓為12V。同位素內(nèi)標(biāo)法定量。結(jié)果:22種BZDs在0.5～50.0μg/L范圍內(nèi)的線性相關(guān)系數(shù)均大于等于0.9990，檢出限范圍為0.02～0.21μg/kg，定量限范圍為0.06～0.68μg/kg。添加濃度水平為1.0，2.0和5.0μg/kg時(shí)，平均回收率范圍為72.2％～116.5％，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差范圍為2.4％～12.2％。結(jié)論:本方法靈敏度和準(zhǔn)確性高、重現(xiàn)性好，可用于

6、中成藥及保健食品中22種BZDs的含量測(cè)定及結(jié)構(gòu)鑒定。
　　第二部分LC-MS/MS同時(shí)檢測(cè)豬肉樣品中22種BZDs殘留的方法研究。
　　目的:建立同時(shí)檢測(cè)豬肉中22種BZDs殘留的LC-MS/MS分析方法。方法:豬肉樣品中殘留的BZDs在pH為5.2的乙酸銨緩沖溶液中酶解后，用氨水調(diào)節(jié)pH值大于9.5，經(jīng)乙酸乙酯-異丙醇(v/v，5∶1)提取，正己烷去脂，MCX離子交換柱凈化，采用第一部分建立的LC-MS/MS方法對(duì)樣品進(jìn)

7、行定性和定量分析。結(jié)果:22種BZDs的檢出限(S/N≥3)范圍為0.01～0.13μg/kg，定量限(S/N≥10)范圍為0.04～0.45μg/kg。添加濃度水平為1.0，2.0和5.0μg/kg時(shí)，平均回收率范圍為72.0％～107.2％，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)范圍為2.3％～9.1％。結(jié)論:本方法靈敏度和準(zhǔn)確性高、重現(xiàn)性好，可對(duì)豬肉樣品中22種BZDs進(jìn)行定性和定量分析。
　　第三部分LC-MS/MS同時(shí)檢測(cè)牛奶樣品中22

8、種BZDs殘留的方法研究。
　　目的:建立同時(shí)檢測(cè)牛奶中22種BZDs殘留的LC-MS/MS分析方法。方法:牛奶樣品中殘留的BZDs在pH為5.2的乙酸銨緩沖溶液中酶解后，用飽和乙酸鉛沉淀蛋白質(zhì)，用氨水調(diào)節(jié)pH值大于9.5，經(jīng)乙酸乙酯-異丙醇(v/v，5∶1)提取，正己烷去脂，MCX離子交換柱凈化，采用第一部分建立的LC-MS/MS方法對(duì)樣品進(jìn)行定性和定量分析。結(jié)果:22種BZDs檢出限（S/N≥3）范圍為0.01～0.11μg/