靈菌紅素產(chǎn)生菌的篩選鑒定及其發(fā)酵條件優(yōu)化.pdf

1、靈菌紅素(Prodigiosins,PG)是一類天然紅色素的總稱,由微生物次級代謝所產(chǎn)生,通常具有三毗咯環(huán)的骨架結(jié)構(gòu)。由沙雷氏菌屬(Serratia)、鏈霉菌屬(Streptomyces)、假單胞菌屬(Pseudomonas)等屬的部分菌株產(chǎn)生。PG屬于生物堿,眾多研究表明它具有廣泛的抗生效果和免疫抑制及抗腫瘤活性,具有重要的研究意義。本文主要研究內(nèi)容與研究成果如下:
　　 1.從南昌市桔園土壤中篩選得到一株產(chǎn)紅色素細(xì)菌,編號N

2、S-17。對菌株NS-17進(jìn)行菌落、細(xì)胞形態(tài)考察,生理生化分析,以及16S rDNA鑒定,形態(tài)學(xué)和生理生化鑒定結(jié)果與粘質(zhì)沙雷氏菌吻合,16S rDNA序列與粘質(zhì)沙雷氏菌相似性達(dá)99％,從而確定該菌株屬粘質(zhì)沙雷氏菌(Serratia marcescens),命名為Serratiamarcescens NS-17。
　　 2.從菌株Serratia marcescens NS-17細(xì)胞中提取的色素溶液經(jīng)柱層析分離與薄層層析純化,得到

3、兩種紅色素組分F1與F2。經(jīng)TOFMS分析,兩種色素組分的質(zhì)子化分子量[MF1+H]=324.2086,[MF2+H]=340.2018,通過計(jì)算其精確分子量可知F1與F2分子式分別為C20H25N3O與C20H25N3O2。通過FT-IR確認(rèn)了F1與F2中的官能團(tuán)組成,通過NMR進(jìn)一步分析確定了F1與F2的分子結(jié)構(gòu)。
　　 3.通過單因素實(shí)驗(yàn),分析了碳源、氮源、KCl、NaCl、接種量、吐溫-80、大豆油、培養(yǎng)基初始pH、裝液

4、量、培養(yǎng)溫度、搖床轉(zhuǎn)速以及培養(yǎng)時(shí)間這12個(gè)因素對菌株Serratia marcescens NS-17發(fā)酵產(chǎn)PG的影響,通過響應(yīng)面,分析了吐溫-80,大豆油,裝液量與搖床轉(zhuǎn)速這四個(gè)因素之間的交互作用。確定了較優(yōu)的PG發(fā)酵條件如下:麥芽糖6g／L,蛋白胨12g／L,NaCl1g／L,KCl2g／L,吐溫-801.2％,大豆油4.5％,培養(yǎng)基初始pH8.0,接種量1.5％,裝液量50mL／(250mL,錐形瓶),搖床轉(zhuǎn)速210rpm,培養(yǎng)溫