江西烯酮酯jiangxienone抑制腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)的細(xì)胞毒效應(yīng)機(jī)制.pdf

1、目的:探討江西烯酮酯jiangxienone抑制腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)的細(xì)胞毒效應(yīng)機(jī)制,為進(jìn)一步開(kāi)發(fā)利用該化合物提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　 方法:利用SRB法評(píng)估江西烯酮酯對(duì)胃癌細(xì)胞株的細(xì)胞毒效應(yīng),采用CFU-F法測(cè)定江西烯酮酯抗癌細(xì)胞的效能比;通過(guò)SSH技術(shù)克隆江西烯酮酯對(duì)胃癌細(xì)胞株作用的差異表達(dá)基因,分析該化合物可能作用的靶基因:利用基因芯片技術(shù)在基因組水平上分析該化合物對(duì)胃癌細(xì)胞株的基因表達(dá)譜的影響,并借助生物信息學(xué)技術(shù)分析該化合物對(duì)細(xì)胞

2、分子調(diào)控網(wǎng)絡(luò)的影響;結(jié)合SSH和基因芯片檢測(cè)結(jié)果擬定該化合物作用胃癌細(xì)胞的靶基因,進(jìn)而利用熒光定量PCR技術(shù)、凝膠阻滯實(shí)驗(yàn)、紫外吸收光譜和單細(xì)胞凝膠電泳法闡明該化合物的抗腫瘤細(xì)胞毒效應(yīng)機(jī)制。
　　 結(jié)果:江西烯酮酯對(duì)SGC-7901,MGC80-3,HGC-27的IC50分別為1.38、2.48、2.31μM。DDP對(duì)SGC-7901細(xì)胞的IC50為22.04μM;江西烯酮酯對(duì)小鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞及胃癌細(xì)胞SGC-7901細(xì)胞集落形

3、成的IC50分別為7.45,6.64.μM,效能比為1.12;SSH實(shí)驗(yàn)共得到38個(gè)差異表達(dá)基因,其中和癌癥密切相關(guān)的基因有15個(gè),分別參與DNA損傷修復(fù)、細(xì)胞周期、免疫及凋亡等生命過(guò)程;基因芯片分析的結(jié)果表明,江西烯酮酯藥物組與溶劑對(duì)照組相比,涉及到1452個(gè)基因的表達(dá)改變,其中621個(gè)基因表達(dá)上調(diào),831個(gè)基因表達(dá)下調(diào)。在表達(dá)發(fā)生改變的基因中,有61個(gè)功能明確的癌癥相關(guān)基因,其中有15個(gè)基因與DNA損傷修復(fù)有關(guān),其他基因分別涉及到腫